详细介绍
产品分类:抗生素
储存条件 4℃,避光,12个月
用途 强烈抑制哺乳动物和原核的RNA聚合酶,能抑制细菌DNA转录合成RNA,可用于抗结核杆菌
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
利福平溶液 | 10ml | FS-R6326 |
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
粘蛋白/粘液1(MUC1)MUC1 ELISA Kit血管生成相关蛋白6抗体包装1g
再生基因蛋白1a(REG-1a)REG-1a ELISA KitMuellerian缪勒管激抑制因子抗体包装5g
载脂蛋白H(Apo-H)Apo-H ELISA Kit酪蛋白激受体A8抗体包装1g
载脂蛋白E(Apo-E)Apo-E ELISA Kit脂肪酰家族成员1抗体包装5g
载脂蛋白B48(apo-B48)apo-B48 ELISA Kit芳香烃受体核转录蛋白样2抗体包装100mg
载脂蛋白B100(apo-B100)apo-B100 ELISA Kit磷化芳香N-乙酰化转移抗体包装1g
载脂蛋白B100(Apo B100)Apo B100 ELISA Kit肌动蛋白结合蛋白1抗体包装500mg
载脂蛋白B(ApoB)ApoB ELISA Kit粘附分子IgG样结构域蛋白2抗体包装5g
载脂蛋白A5(apo-A5)apo-A5 ELISA Kit肌动蛋白结合蛋白DOC6抗体包装100mg
载脂蛋白A1(apo-A1)apo-A1 ELISA KitAFG3样蛋白2/脊髓小脑共济失调蛋白28抗体包装500mg
载脂蛋白A1(Apo A1)Apo A1 ELISA Kit激活受体相互作用蛋白1抗体包装1g
孕受体(PROGR)PROGR ELISA Kit固类还原家族7成员A2抗体包装5g
孕(PROG)PROG ELISA Kit蛋白激AKT1,2,3抗体包装25g
孕激/孕(PROG)PROG ELISA Kit帕金森病相关蛋白ATP13A2抗体包装5g
诱导型一氧化合成(iNOS)iNOS ELISA Kit肌侧索硬化蛋白2抗体包装100g
缪勒激2型受体抗体Ⅱ型胶原(COL2)AT-406 是一种有效的,可口服的 Smac 模拟物,为 IAPs 的拮抗剂,能够抑制 XIAP,cIAP1 和 cIAP2 蛋白,Ki 值分别为 66.4,
利福平溶液CD18/LFA-1/FITC 荧光标记白粘附蛋白IgG四对苯二 98%
CD19/FITC 荧光标记CD19IgG硫铈,四水 AR,98%
Phospho-CD19 (Tyr531) /FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠化CD19IgG硝铈,六水 99.5% metals basis
CD19/PE 荧光PE标记CD19IgG醋铈 99.99% metals basis
CD20/FITC 荧光标记CD20IgG硫铈,四水 99.9% metals basis
CD20/Biotin 生物化CD20IgG硝钆,六水 AR,99%
CD20/MS4A1/PE 荧光PE标记CD20IgG硝钕,六水 AR,99.0 %
CD25/IL-2RA /PE-Cy5 荧光PE-Cy5标记兔抗人、大、小鼠白介2受体a链IgG醋钕 99.9% metals basis