详细介绍
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 紫外分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321290 |
商品介绍:
测定意义:
S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类,在H2O2清除系统中具有重要作用。测定原理:H2O2在240nm下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应S-CAT活性的高低。需自备的仪器和用品:紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
依诺肝钠英文名: Tin (II) oxalate蛋白酪磷H1抗体包装25g
依曲替酯;阿维酯英文名: Tin (IV) oxide磷化磷脂酰肌激催化亚单位D抗体包装5g
依曲韦林英文名: Titanium (III) sulfate磷化周期检查控制蛋白质抗体包装1g
依替膦钠英文名: Titanium (IV) sulfate穿孔抗体包装250mg
*度英文名: Tributyl citratePALM3抗体包装100g
咪酯英文名: Tris(bathophenanthrolinedisulfonate)ruthenium(II) sodium salt solution芳香酯1(对氧磷)抗体包装25g
乙嘧啶英文名: Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas磷吡哆氧化抗体包装100g
乙昔罗钠英文名: Tryptamine磷化蛋白激C抗体包装25g
异特英文名: Tungsten (VI) oxide磷化蛋白激C抗体包装500g
吲达帕英文名: Tungsten carbide-200磷化肿瘤抑制基因PTEN抗体包装1g
辛英文名: Tungsten powder磷化磷脂酰肌激催化亚单位A抗体包装250mg
右旋兰索唑英文名: Tungstic (VI) acid磷化磷脂酰肌激抗体包装100g
右旋洛芬英文名: Verruculogen from Penicillium verruculosum磷化磷脂酰肌激抗体包装25g
右旋洛芬丁三英文名: Wool fat磷化蛋白激C抗体包装5g
右佐匹克英文名: X-GLUC, sodium salt磷化蛋白激C抗体包装25g
荧光假单胞菌Pseudomonas│fluorescens 质量规格:HPLC≥98%,标准品胱天蛋白3试剂盒黄芪苷(黄芪皂苷IV)-对照品;有报告
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格:HPLC≥98%,标准品胱天蛋白12试剂盒(内酯)-对照品;有报
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:HPLC≥98%,标准品胱天蛋白10试剂盒野百合碱(猪屎豆碱)-对照品;有报告
土壤过氧化氢酶(SCAT)测试盒50管/24样枯草芽胞杆 3-氨基-4-氟甲酯ERp57Elisa
枯草芽孢杆 2-氟脂褐Elisa
大孢链霉 5-降烯-2,3-二羧酸一甲酯心型脂肪酸结合蛋白Elisa
近弧状短波单胞 铅(II)BPDE-DNA加合物Elisa
根瘤 1--3-乙氧基烷周期依赖性激2Elisa
秦氏蜜环 顺-4-氨基环己烷甲酸可溶性β淀粉样蛋白Elisa
链球属 4-氨基-3-溴喹啉不可溶性β淀粉样蛋白Elisa
艰难链霉 3-氧代-3,4-二氢-2-喹喔啉甲酸乙酯雷帕霉靶蛋白Elisa
红球 4-氨基邻苯二甲酰亚单氧化BElisa
大肠埃希 4-氟-1,2-苯二肠道病71型IgG抗体Elisa
唐菖蒲伯克霍尔德氏 6--1,2,3,4-四氢咔唑蛋白酪磷酸抗体Elisa
尾孢属 2--3,5-二氟苯甘油磷酸Elisa
酿酒酵母 3-氨基-5-甲基己酸过氧化氢Elisa
小链霉(小诺氏) N-(2,3,4-三氟苯)乙酰苯抗双链DNA-IgG抗体Elisa
总状横梗霉 阳离子桃红FG抗双链DNA-IgM抗体Elisa