详细介绍
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义 脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶,可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯,以供组织氧化供能和贮存,并在不同的组织表现出不同的生理意义。 测定原理 脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕榈酸酯产生4-硝基苯酚,在400nm有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321197 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
小白菊内酯(标准品)英文名: Carbocistein;S-Carboxymethyl-L-cysteine乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白包装100g
小驳骨(标准品)英文名: S-Benzyl-L-cysteine组蛋白H2B.s抗体包装25g
小檗红碱(标准品)英文名: L-Glutamic acid hydrochloride组蛋白去乙酰化4+5+9抗体包装5g
小檗碱(标准品)英文名: Nω-Nitro-L-arginine热休克蛋白27相关蛋白1抗体包装25g
小檗皮(标准品)英文名: Nalpha-Benzoyl-L-arginine卟胆原脱抗体包装5g
小豆蔻明(标准品)英文名: L-Asparagine Anhydrous异质核糖核蛋白U2样蛋白抗体包装25g
小茴香(标准品)英文名: L-Asparagine anhydrous肝癌衍生生长因子2抗体包装5g
小蓟(标准品)英文名: N'-Trityl-L-asparagine肝癌相关抗原57抗体包装1g
小秦艽(标准品)英文名: L-Aspartic Acid 1-Benzyl Ester补体C3抗体包装5g
小叶榕(标准品)英文名: L-Aspartic acid 1-methyl ester型流感病血凝抗体包装25ml
缬草三酯英文名: L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride状旁腺功能亢进蛋白2/分裂周期73抗体包装5ml
薤白(标准品)英文名: S-Methyl-L-cysteine线粒体丝蛋白抗体包装100g
辛弗林(标准品)英文名: S-Trityl-L-cysteine/钠超化激活环核苷门控通道蛋白2抗体包装25g
辛弗林盐盐(标准品)英文名: L-Glutamic Acid 1-Methyl Ester热休克蛋白β7抗体包装5g
辛辣内酯A(标准品)英文名: L-Glutamic acid diethyl ester hydrochloride/钠超化激活环核苷门控通道蛋白3抗体包装1ml
平常假丝酵母Candida│inconspicus 质量规格:≥98%,标准品用于含量测定梅螺旋体试剂盒;Triptolide
大丽花轮枝孢(棉花黄萎病菌)Verticillium│dahliae 质量规格:≥98.5%,BR,二合物梅螺旋体试剂盒红;Celastrol
长裙竹荪Dictyophora│indusiata 质量规格:纯度>99%,BR,可用于培养锚蛋白B试剂盒落新妇苷;Astilbin
脂蛋白酯酶(LPL)测试盒50管/24样麦根腐平脐蠕孢 二甲基二酸二甲酯生物Elisa
希瓦氏属 3,5-二溴甲酯转铁蛋白受体1Elisa
青春双歧杆 2-硝基-9,9-二甲基芴丝虫抗体IGgElisa
乌芝 1,6-己成纤维生长因子18Elisa
茄链格孢 奥沙秦钠表面原性蛋白Elisa
哈里法克斯希瓦氏 2,3-吡啶二甲酸二甲酯正五聚蛋白2Elisa
刚果嗜皮 1,1'-联萘羧肽B2Elisa
赭色掷孢酵母 2,3-二氨基血纤蛋白原γ链Elisa
黄蜜环 2,6-萘二磺酸钠3-羟-3-甲戊二酸单酰还原Elisa
马葡萄球 2,3-二甲酸去乙酰化Sirtuin-4Elisa
农药速测 5--2-苯基-3H-咪唑-4-甲去乙酰化Sirtuin-3Elisa
大肠埃希氏杆 3--4-甲氧羰基苯基酸红富铁Elisa
大肠埃希氏 4-乙酰吡啶6磷酸果糖2激;果糖-2,6-二磷酸3Elisa
杆状毛霉 五氟磷酸化MEK激Elisa
杂色曲霉 L-苏P-CREBElisa