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过氧化物酶染色液

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更新时间:2022-07-24 09:34:46浏览次数:438

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

供货周期 现货 规格 4×10ml
货号 FS-R6776 应用领域 化工
主要用途 仅供科研 货号 FS-R6776
过氧化物酶染色液公司正在销售的产品:鸡心钠肽(ANP)试剂盒Anti-PTGS2 Antibody磷酸化转录因子SOX9蛋白抗体
鸡酮酸脱氢酶β(PDHβ)试剂盒Anti-PTGS2 Antibody磷酸化蛋白磷酸酶2抗体
鸡胰腺再生蛋白3γ(REG3γ)试剂盒Anti-PTGS2 Antibody长链脂肪酸辅连接酶抗体
鸡髓样前体抑制因子2(MPIF2)试剂盒Anti-PTK2 Antibo

详细介绍

产品分类:酶类染色

储存条件:4℃,避光,6个月

用途:过氧化物酶酶染色

注意事项:ICSH推荐方法。主要由联苯胺等组成,染色液需临用前配置,且不宜久置。

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!

产品名称

规格

货号

过氧化物酶染色液

4×10ml

FS-R6776

 

63.jpg 

 

配制与标定的实验原理:

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。

配制步骤:

1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。

13.jpg 

 

实验方法与判定:

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。

3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

使用方法:

1.  常用筛选浓度

注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。

一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。

1)  第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。

2)  根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3)  第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4)  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5)  按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1)  转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。

注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2)  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3)  筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。

4)   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5)   之后更换正常培养基培养即可。

地瓜藤(标准品) Eupalinolide B整合α5抗体Integrin α5包装25g

地黄(生地黄)(标准品) Vinorelbine整合β1/Integrin β1抗体包装5g

地锦草(斑地锦)(标准品) Vinorelbine tartrate整合αVβ3抗体包装100g

地锦草(标准品) Nifura胰岛样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗体包装25g

地龙(参环毛蚓)(标准品) Nifura型流感病血凝抗体包装5g

地稔(标准品) Hydroxytyrosol型流感病血凝抗体包装25g

地蜈蚣(标准品) 4',5,7-Trihydroxy-3',6-dimethoxyflavone整合αVβ5抗体包装5g

地榆(地榆)(标准品) Tiliroside干扰调节因子1抗体包装1g

地榆皂苷II(标准品) 4',5-Dihydroxy-7-methoxyflavone白介6包装25g

地榆皂苷I(标准品) Khasianineγ干扰诱导蛋白16抗体包装5g

滇藏五味子G Ligustroflavone整合αVβ1抗体包装1g

滇桂艾纳香(标准品) Schaftoside白介-20抗体包装5g

滇鸡血藤(标准品) 9,10-Dimethoxy-2,3-(methylenedioxy)-13,13a-didehydrob干扰相关发育调节因子2抗体包装1g

滇(标准品) Tangeretin白介-1受体相关激2抗体包装5g

化木兰花碱 Tangeretin磷化胰岛受体β抗体包装25g

舟形毛壳Chaetomium│cymbiforme 质量规格:HPLC>99%,标准品柯萨奇病腺病受体试剂盒黄芪苷;Astragaloside I

需盐色盐杆菌Chromohalobacter│salexigens 质量规格:>99%,医药级柯萨奇病IgE试剂盒虎杖苷;Polydatin

大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:>99.0%,BR柯萨奇病IgA试剂盒槲皮苷;Quercitrin
过氧化物酶染色液IL-14(human)  人白介su-14规格: 96T

IL-15  人白介su-15规格: 48T

IL-16  人白介su-16规格: 48T

IL-17  人白介su-17规格: 48T

IL-18  人白介su-18规格: 48T


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