详细介绍
产品分类:染色其他
储存条件:室温,24个月
用途:主要用于软化较坚硬的材料如木质化导管,使之容易切片。
注意事项:主要由甘油、乙醇等组成。
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
甘油乙醇软化剂 | 500ml | FS-R7187 |
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
米兰农霉菌胎球蛋白AHuman CDADC1 (Cytidine and dCMP deaminase domain-containing protein 1) ELISA KIT牛热休克蛋白72(HSP-72)免疫试剂盒
墨西哥假黄色单胞菌叉头蛋白L2抗体Human DMTF1 (Cyclin-D-binding Myb-like transcription factor 1) ELISA KIT牛热休克蛋白70(HSP-70)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌叉头相关转录因子3抗体Human CCNYL1 (Cyclin-Y-like protein 1) ELISA KIT牛氧化(aldehyde oxidases,AO)免疫试剂盒
细黄链霉菌铁蛋白抗体Human BSN(Protein bassoon) ELISA Kit牛固(ALD)免疫试剂盒
ChromohalobacterFMS样酪激3配体抗体Human CCNYL2 (Cyclin-Y-like protein 2) ELISA KIT牛羟脂酰脱氢免疫试剂盒
宓花豆根瘤菌碱性成纤维生长因子9抗体Human CCNYL3 (Putative cyclin-Y-like protein 3) ELISA KIT牛羟甲基戊二单酰(HMG-CoA)免疫试剂盒
塔宾曲霉原癌基因酪蛋白激FES抗体Human CRELD1 (Cysteine-rich with EGF-like domain protein 1) ELISA KIT牛羟脯(Hyp)免疫试剂盒
伞枝犁头霉成纤维生长因子16抗体Human CPLX2 (Complexin-2) ELISA KIT牛前列腺F2α(PGF2α)免疫试剂盒
柱形矛束霉成纤维激活蛋白α抗体Human CLK1 (Dual specificity protein kinase CLK1) ELISA KIT牛前列腺E2(PGE2)免疫试剂盒
水生恩氏菌Fas相关磷1抗体Human CYP3A5(Cytochrome P450 3A5) ELISA Kit牛葡萄糖激(GCK)免疫试剂盒
粪产碱杆菌叶受体4抗体Human CLPTM1 (Cleft lip and palate transmembrane protein 1 homolog) ELISA KIT牛葡萄糖6磷脱氢(G6PD)免疫试剂盒
科氏芽孢杆菌(可订购)Wnt信号受体蛋白抗体Human CORIN (Atrial natriuretic peptide-converting enzyme) ELISA KIT牛皮质(Cortisol)免疫试剂盒
樟疫霉磷化载脂蛋白A1抗体Human CLK3 (Dual specificity protein kinase CLK3) ELISA KITIIIA链(F13A1)免疫试剂盒
链格孢磷化载脂蛋白A1抗体Human CORT (Cortistatin) ELISA KIT牛凝血抗凝血Ⅲ复合物(TAT-III)免疫试剂盒
冬虫夏草(冬虫夏草菌,蝙蝠蛾被毛孢,中国被毛孢)磷化碱性成纤维生长因子受体1抗体Human CLUL1 (Clusterin-like protein 1) ELISA KIT牛内皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫试剂盒
三叶草根瘤菌脂肪酰水解1抗体Human CD42(Cluster of Differentiation 42) ELISA Kit牛内皮脂(EL)免疫试剂盒
人苍白杆菌Ochrobactrum│anthropi 质量规格:分析标准品,≥99.5% (GC)L-缬
球孢白僵菌Beauveria│bassiana 质量规格:分析标准品,≥99.8%(GC)腺苷
大肠埃希氏菌DH5α/pET30a/pheS+pheTEscherichia│coli 质量规格:分析标准品,>99.5%(GC)维生K1
甘油乙醇软化剂human frizzled homolog 8,FZD8 ELISA Kit 人卷曲蛋白8规格: 48T
human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit 人蜗牛同源物2规格: 48T
Human golgi protein 73,GP-73 ELISA Kit 人高尔基蛋白73规格: 48T
Human TU3A Protein ELISA Kit 人TU3A蛋白规格: 48T
Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA Kit 人电子转移黄su蛋白β肽规格: 48T