原代内皮细胞培养体系

常用的细胞培养基：

1、BME细胞培养基

基础Eagle培养基（Basal Medium Eagle），1955年Eagle设计，BSS＋12种氨基酸8种维生素。简单、便于添加，适于各种传代细胞系和特殊研究用，在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMDM等。

2、MEM细胞培养基

又称Eagle培养基（Minimal Essential Medium），1959年在Eagle's基础培养基（BME）上修改而来，删去赖氨酸、氨基酸浓度增加，适合多种细胞单层生长，有可高压灭菌品种，是一种最基本、试用范围的培养基，但因其营养成分所限，针对生产之特定细胞培养与表达时，并不一定是使用的培养基。

3、DMEM细胞培养基

DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培养基，由MEM培养基改良而来，起初是为小鼠成纤维细胞设计的。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的4倍，采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L，这就是大家常说的低糖和高糖了。

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细胞培养基的概念及基本构成：

细胞培养现在已成为应用于生命科学的主要技术之一，它是从生物机体中取出部分组织分散成单个细胞或直接从机体取出单个细胞，并将它们在有利于生长的人工环境中培养的统称。

细胞培养基通常包括适当的细胞能量来源和调节细胞周期的化合物。一个典型的培养基还需要补充氨基酸，维生素，无机盐，葡萄糖和血清，以提供生长因子，激素和附着因子。除了营养外，培养基也有助于保持培养体系中的pH值和渗透压平衡。动物细胞体外培养中最关键的步骤之一即为选择适当的细胞培养基，生物制品的制备和生产均需要依赖细胞培养基，细胞培养基是生物制品生产的关键核心原材料。

细胞培养基的种类与基本成分：

一、天然培养基

天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期，体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大，因此逐渐被合成培养基所替代。

二、小牛血清

用于细胞培养的血清主要是牛血清，培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。选择用牛血清培养细胞的原因主要是来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。

牛血清分为小牛血清、新生牛血清、胎牛血清。小牛血清取自出生 10～30 天的小牛；新生牛血清取自出生 24 小时之内的新生牛；胎牛血清应取自剖腹产的胎牛。显然，胎牛血清是高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的，但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。牛血清中含有丰富的细胞生长必须的营养成份，具有极为重要的功能。

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