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详细介绍
商品属性：
| 产品名称 | 辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒50管/24样 |
| 检测方法 | 可见分光光度法 |
| 产品规格 | 50管/24样 |
| 产品货号 | AS63211 |
商品介绍：
| 测定意义 辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循环（TCA）的主要氢受体，生成的NADH经呼吸电子链（ETC）传递把电子交给氧，在合成ATP的同时，形成大量的ROS，同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高，处于过氧化状态。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外，NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。 测定原理 分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH，NADH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT）为甲瓒，在570nm下检测吸光值；而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH，进一步采用MTT还原法检测。 需自备的仪器和用品 可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
6磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6PGDH）测试盒50管/48样 辅酶Ⅱ系列
肌酸激酶(CK)测试盒100管/96样 辅酶Ⅱ系列
肌酸激酶(CK)测试盒50管/48样 辅酶Ⅱ系列
脂肪酸合成酶（FAS）测试盒100管/96样 辅酶Ⅱ系列
脂肪酸合成酶（FAS）测试盒10管/9样 辅酶Ⅱ系列
脂肪酸合成酶（FAS）测试盒25管/24样 辅酶Ⅱ系列
脂肪酸合成酶（FAS）测试盒50管/48样 辅酶Ⅱ系列
蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒100管/96样 辅酶Ⅱ系列
蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒50管/48样 辅酶Ⅱ系列
硫氧还蛋白氧化还原酶（TrxR）测试盒100管/96样 辅酶Ⅱ系列
硫氧还蛋白氧化还原酶（TrxR）测试盒50管/48样 辅酶Ⅱ系列
还原酶（GR）测试盒100管/96样 辅酶Ⅱ系列
还原酶（GR）测试盒50管/48样 辅酶Ⅱ系列
还原型（GSH）测试盒100管/96样 系列
还原型GSH）测试盒50管/48样 列
氧化型GSSG）含量测试盒100管/96样 系列
氧化型GSSG）含量测试盒50管/48样 列
过氧化物酶（GPX）测试盒100管/96样 系列
过氧化物酶（GPX）测试盒50管/48样 列
硫氧还蛋白过氧化物酶（TPX）测试盒100管/96样 系列
硫氧还蛋白过氧化物酶（TPX）测试盒50管/48样 系列
转移酶（GST）测试盒100管/96样 系列
T3鲨 鱼三碘甲状腺原氨酸酶联免疫试剂盒 T3 ELISA Kit
Cortisol鲨 鱼酶联免疫试剂盒 Cortisol ELISA Kit
T4鲨 鱼甲状腺素酶联免疫试剂盒 T4 ELISA Kit
T鲨 鱼睾酮酶联免疫试剂盒 T ELISA Kit
E2鲨 鱼雌二醇酶联免疫试剂盒 E2 ELISA Kit
NDM-1新德里超级细菌金属β-内酰胺酶-1酶联免疫试剂盒 NDM-1 ELISA Kit
orexin小尾寒 羊增食欲素酶联免疫试剂盒 orexin ELISA Kit
LEP小尾寒 羊瘦素酶联免疫试剂盒 LEP ELISA Kit
POMC小尾寒 羊阿黑皮素原酶联免疫试剂盒 POMC ELISA Kit
PMSG孕 马血清酶联免疫试剂盒 PMSG ELISA Kit
CORT犀 牛皮质酮酶联免疫试剂盒 CORT ELISA Kit
辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒50管/24样T田鼠睾酮酶联免疫试剂盒 T ELISA Kit
MAPK丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶酶联免疫试剂盒 MAPK ELISA Kit
MAP2K5双特异性丝裂原活化蛋白激酶5酶联免疫试剂盒 MAP2K5 ELISA Kit
BPA双酚A酶联免疫试剂盒 BPA ELISA Kit
GC食蟹猴胰高血糖素酶联免疫试剂盒 GC ELISA Kit
C-Peptide食蟹猴C肽酶联免疫试剂盒 C-Peptide ELISA Kit
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