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详细介绍
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS632167 |
商品介绍：
测定意义： 羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损，进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一，在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。 测定原理： H2O2/ Fe2+ 通过Fenton反应产生羟自由基，水杨酸能有效捕捉产生的羟自由基并与其反应生成有色物质2，3-二羟基苯甲酸，在510nm处有最大吸收峰，加入具有清除能力的物质后，有色物质便会减少，从而可以根据吸光值的数值判断样品清除羟自由基的能力。 自备实验用品： 恒温水浴锅、酶标仪、96孔板和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
毒蕈碱型受体M3(CHRM3)英文名：CHRM3 ELISA Kit毛细管形态发生蛋白1抗体包装100g
毒蕈碱型受体M2(CHRM2)英文名：CHRM2 ELISA Kit肌钙集蛋白/收钙抗体包装25g
凋亡蛋白激活因子1(APAF1)英文名：APAF1 ELISA Kit钙结合蛋白样39抗体包装5g
淀粉样前体蛋白(APP)英文名：APP ELISA Kit癌胚抗原相关粘附分子3抗体包装1ml
淀粉样蛋白β前体样蛋白1(APLP1)英文名：APLP1 ELISA Kit20号染色体开放阅读框31抗体包装1g
淀粉样蛋白β1-42(Aβ1-42)英文名：Aβ1-42 ELISA Kit成簇相关蛋白1抗体包装25g
淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)英文名：Aβ1-40 ELISA Kit肿瘤/抗原2抗体包装5g
碘腺原脱碘Ⅲ(DIO3)英文名：DIO3 ELISA Kit肿瘤/抗原1B包装1g
碘腺原脱碘Ⅱ(DIO2)英文名：DIO2 ELISA Kit皮肤T淋巴瘤相关抗原5抗体（脑膜瘤表达抗原6）包装5g
抵抗(RETN)英文名：RETN ELISA Kit肿瘤/抗原3抗体包装10mg
低氧诱导因子2α(HIF2α)英文名：HIF2α ELISA Kit脑多巴神经营养因子抗体包装1g
低氧诱导因子1α(HIF1α)英文名：HIF1α ELISA Kit钙依赖分泌激活蛋白2/自闭症的相关蛋白抗体包装5g
低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)英文名：LRP1 ELISA Kit胆囊收缩A受体抗体包装100mg
低密度脂蛋白受体衔接蛋白1(LDLRAP1)英文名：LDLRAP1 ELISA Kit小脑肽3抗体包装1g
低密度脂蛋白受体(LDLR)英文名：LDLR ELISA Kit周期依赖性激样5抗体包装1g
根瘤菌Rhizobium│sp. 质量规格：>98%,BR,醋盐形式远端上游元件结合蛋白1试剂盒盐伊立替康;Irinotecan hy
: ivcas7.00510资源名称: 苏云金芽孢杆菌 质量规格：>920U/MG,USP原纤维蛋白-1试剂盒氧化前胡;Oxypeucedanin
Z20259资源名称: 嗜热链球菌 质量规格：>97%原钙黏1试剂盒羊藿次苷I;Icarisid I
羟自由基清除能力测试盒100管/96样Paraconiothyrium sp. 4-乙酸乙酯植酸Elisa
火木层孔 六钴酸锌植酸Elisa
异常汉逊酵母 盐酸奥洛他定癸酸甘油酯-1Elisa
锗栓孔 (淡黄褐栓) 1-(N-Boc-氨乙基)哌40S核糖体蛋白S3Elisa
德氏乳杆保加亚亚种 4-脲脊髓灰质炎病IgG抗体Elisa
脱硫弧脱硫亚种（脱硫微螺、脱硫螺、脱硫杆、脱硫芽孢弧、脱硫弧） 乙二四乙酸铜钠二水合物脊髓灰质炎病IgM抗体Elisa
松针散斑壳 苯基胍碳酸盐可溶性CD28分子Elisa
生假丝酵母 5-甲基-2-基质金属蛋白14Elisa
肿痂链霉 2,2-二甲基-3-羟基酸甲酯状瘤病16抗体Elisa
光柄滑锈伞 2-甲氧基-4-甲基嘧啶状瘤病18抗体Elisa
辽宁类芽孢杆 4-巴豆酸抗Sa抗体Elisa
蚁巢伞属 羟酸盐球蛋白G Fc段受体ⅠElisa
大肠埃希 球蛋白G Fc段受体ⅡElisa
运动节杆 三乙酰酮铝性休克综合征1Elisa
酿酒酵母 3,5-二溴吡啶-4-甲酸色P4502D6Elisa
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