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双抗体夹心法检测HBsAg试剂盒
阅读:1742 发布时间:2016-7-12关键词:HBsAg试剂盒ELISA 简介:ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关液体中ACA IgA含量。 产品报价说明: 产品名称:HBsAg试剂盒ELISA 规格:96T/48T 运输:2~8°保存运输 服务:提供免费代测服务,提供。
以已知抗体(抗HBs)包被载体,然后将含有抗原的待检标本加入,共同孵育后,抗原结合于包被抗体上,再加入酶标记特异抗体(酶标抗HBs),酶标抗体连接到抗原上,zui后加入底物溶液,根据颜色反应来判定抗原含量。
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中乙肝表面抗原ELISA试剂盒(HBsAg)含量。
实验原理
本试剂盒应用间接法测定标本中人乙肝表面抗原(HBsAg)水平。用纯化的人乙肝表面抗原(HBsAg)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的乙肝表面抗原(HBsAg)标准品和未知浓度的HBsAg待检样品,温育后,加入生物素标记的抗IgG抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙肝表面抗原(HBsAg)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人乙肝表面抗原(HBsAg)浓度。
一、材料
HBsAg试剂盒,本试剂盒含:
1、包被抗-HBs反应条 1瓶
2、酶结合物 1瓶
3、HBsAg阳性对照 1瓶
4、HBsAg阴性对照 1瓶
5、洗涤液:用前每瓶作1:20稀释 1瓶
6、显色剂(TMB)A 1瓶
7、显色剂(TMB)B 1瓶
8、终止液 1瓶
二、方法
1、加入待测标本每孔0.05ml,并设HBsAg阳性对照2孔,HBsAg阴性对照2孔,空白对照1孔,然后加入酶结合物每孔1滴(0.05ml、空白对照孔不加),充分混匀后置37℃孵育30分钟。
2、洗板:弃去反应条孔内液体、拍干、用洗涤液注满每孔,弃去拍干,反复五次后拍干。
3、显色剂:先加显色剂A每孔1滴(0.05ml),然后再加显色剂B每孔1滴(0.05ml),混匀,37℃孵育10分钟。
4、每孔加终止液1滴(0.05ml),混匀。
三、结果
比色法:波长450nm,先用空白孔校零点,然后读取各孔光密度值。
样品OD值/阴性对照平均OD值≥ 2.1判断为阳性,否则为阴性。
备注:阴性对照平均OD值低于0.05作0.05计算,高于0.05按实际OD值计算。阳性对照OD值≥0.8,实验结果有效。
四、注意事项
1、试剂盒置2℃~8℃保存。
2、使用前试剂应摇匀,并弃去1~2滴后垂直滴加。
3、从冷藏环境中取出试剂盒内全部瓶装试剂及待测标本所需微孔条,置室温平衡30分钟后再行测试,余者应及时封存于冰箱中以备后用。
4、待测标本不可用NaN3防腐。
5、不同批号试剂请勿通用。
6、结果判断须在10分钟内完成。
7、若浓缩洗涤液出现结晶时,请置37℃至溶解。