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东南大学刘老师咨询细胞裂解液检测IL-24指标样本收集问题
阅读:765 发布时间:2015-12-162015年三月份东南大学张同学在我司代测了人IL-24 ELISA试剂盒,现张同学的实验课题已圆满结束。同实验室学生刘同学受张同学介绍昨日我司销售部吴,准备近期同样做人IL-24 ELISA试剂盒的课题检测。准备收集人的细胞裂解液样本做检测。关于样本的收集方法希望得到我司的。沟通结束后,我司技术部以WORD文档形式详细整理了细胞裂解液的收集方法答复刘老师。刘老师也表示,样本预计半个月左右收集完成,收集完成后将样本交由我司进行代测。期间任何技术问题我司*时间提供。
细胞裂解液收集方法:
1).吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2).收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3) .加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
4).将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。
5).4℃ 10000×g 离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。