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苏木素HE 染色月底*
阅读:953 发布时间:2015-9-22上海恒远生物生产的苏木素染色液(Hematoxylin Staining Solution)综合了多种经典的苏木素染色方法,例如Harris法、Mayer法等,简化了操作步骤,缩短了操作时间,并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。可以用于组织切片或培养细胞的染色。桂花飘香之日开启月底*活动,详情请。
本苏木素染色液染色后细胞核呈蓝色。
本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。
本染色液可以重复使用,直至认为效果不佳时再换用新的染色液。一个包装的本染色液至少可以染色
200个样品。苏木素(Hematoxylin)和伊红( Eosin)染色,简称HE 染色,是病理学常规制片中zui基本的染色方法,应用机器广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中,常用HE 染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE 染色组织切片的基础上进行的。在HE 染色的组织切片中,细胞核呈蓝色,细胞浆呈红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。苏木素伊红染色试剂盒中,苏木素染色液采用进口的高纯度苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成,甲醇等有害物质,对细胞核染色效果好。其特点:长期保存,不易产生沉淀和金属; 应用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等;苏木素染色液可以重复使用。
染色原理:
1、细胞核染色的原理:
苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
2、细胞浆染色的原理:
伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH 值密切相关。当染液的pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。
3、分化作用:
染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE 染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。
4、返蓝作用:
分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,故分化之后,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。
注意事项:
1、切片脱蜡应尽量干净。
2、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇应经常更换新液。
3、1%的盐酸乙醇分化液的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和1%的盐酸乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便*清洗酸。
4、乙-乙醇混合固定液是由醚和95%乙醇等量混合而得,再加入适量乙酸,密闭保存。
5、冷冻切片染色时间尽量要短。
6、促蓝液常使用0.2~1%氨水水溶液或Scoot 促蓝液或0.1~1%碳酸锂水溶液。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
8、使用场所应通风,并远离火源。
有效期: 12 个月有效。
中文名称: 苏木色精
其他中文名称: 苏木素;苏木色素;苏木精
苏木素英文名称: Hematoxylin
其他英文名称: 7,11b-Dihydrobenz[b]inde,2-d]pyran-3,4,6a,9,10(6H)-pentol;C.I.75290;Natural Black 1