Graves 病患者外周血淋巴细胞 NF-κB p65 活性与血清丙二醛水平升高

张海三 张红星 张姣媚 刘保平

摘 要 目 的 ： 探 讨 Graves （GD） 病 患 者 血 清 丙 二 醛 （MDA） 水 平 及 NF-κB p65 亚 基 活 性 ， 了 解 其 免疫、氧化应激状态 。 方法：纳入 GD 患者（患者组）90 例与健康对照（对照组）82 例，放射免疫方法检测其血 清 FT3 、FT4、TSH 及 酶 联 免 疫 吸 附 法 （ELISA）测 定 MDA 水 平 及 淋 巴 细 胞 NF-κB p65 活 性 。 应 用 SPSS13．0 统 计 软 件 进 行 数 据 处 理 ，t 检 验 分 析 患 者 组 与 对 照 组 血 清 FT3 、FT4、TSH、MDA 水 平 及 淋 巴 细 胞 NF-κB P65 活性，pearson 相关分析它们之间的相关性。结果：对照组与患者组血清 FT3、FT4、TSH 水平差异有显著性，P值均小于 0．001；两组间血清 MDA 水平比较差异有统计学意义，t ＝ －19．91，P ＝ 0．000；两组间淋巴细胞 NF-κB p65 活性比较差异有统计学意义，t ＝ －19．84，P ＝ 0．000。 患者组血清 MDA 水平与血清 FT3、淋巴细胞 NF-κB p65 活性正相关（r 值分别为 0．354、0．661，P 值分别为 0．001、0．000），与 TSH 负相关（r ＝ －0．261，P ＝ 0．013 ） ，与 FT4 不 具 有 统 计 学 意 义 的 相 关 （r ＝ 0．104 ，P ＝ 0．329 ） 。 NF -κB p65 活 性 与 FT3 正 相 关（r ＝ 0．287，P ＝ 0．006）；与 FT4 和 TSH 无 统 计 学 意 义 的 相 关 性 。 结 论 ：GD 患 者 外 周 血 淋 巴 细 胞 NF-κB活 性 及 血 清 MDA 水 平 增 高 ，与 GD 严 重 程 度 相 关 ，减 少 氧 化 应 激 与 免 疫 损 伤 应 成 为 GD 治 疗 过 程 中 考虑的重要因素。

关键词 Graves 病； 氧化应激； 免疫损伤； 丙二醛； 核转录因子

弥漫性毒性甲状腺肿 （Graves disease，GD）是内分泌疾病甲状腺功能亢进症 （甲 亢 ）的 主 要临 床 类 型 之 一 。 多项研究提示患者外周血中甲状 腺 相 关 抗 体、多种免疫球蛋白及多种细胞因子水 平 异 常 ［1 －2 ］，因此被认为是一种自身免疫性疾病。

真核生物中的核转录因子 NF-κB，是 由 复 杂的多肽亚单位组成的蛋白家族，作为信号传导途径 中 的 枢 纽，参与多种生物过程 ，对 氧 化 应 激 较为 敏 感，可以引起一系列细胞因子转录改变级联反 应。 GD 患者存在甲状腺滤泡破坏 ，使 甲 状 腺素 异 常 释 放，这一过程中也可能产生氧化应激损伤［3］，激 活 由 NF-κB 介导的细胞损伤［4 ］。 丙 二 醛（malonaldehyde，MDA） 可反映体内脂质过氧化 程度，间接反映细胞损伤程度，是氧化应激损中的重要因子。本研究通过检测 GD 患者外周血淋巴细胞NF-κB 活 性 及 血 清 MDA 水 平， 分 析 二 者 变 化 关系， 了解免疫调节异常及氧化应激损伤在该病中的作用。

1 对象与方法

1．1 研究对象 患者组来自 2005 年 2 月至 2009年 2 月在甲状腺疾病门诊*就诊的 GD 患者 90例，符合 ICD-10 GD 患者诊断标准，具有典型的甲亢症状：怕热，多汗，纳差，消瘦，心悸等，血清 FT3、FT4 升高，TSH 降低；甲状腺摄碘率高，核素扫描摄锝明显增强。 甲状腺彩超呈“火海征”；病程不超过2 年，其中男 31 例，女 59 例，年龄 25 ～ 40 岁，平均（31．7 ± 4．38）岁；病程 0．5 ～ 7 个 月，中 位 数 1．4 个月，平均（1．7 ± 1．31）个月。 对照组 82 例来自健康体 检 人 群，与患者年龄匹配，其 中 男 30 例，女 52例，年龄 25 ～ 40 岁，平均（31．7 ± 4．46）岁。 以上受检者均排除骨关节疾病、 其他内分泌代谢疾病以及肝肾功能不全者， 排除妊娠或服用某些影响甲状腺功能药物者。独立样本 t 检验分析甲亢组与对照组间年龄比 较：t ＝ －0．109，P ＝ 0．913； 性 别 构 成 χ2 检 验 比较：χ2 ＝ 0．086，P ＝ 0．769。所有病例与对照均经过河南省伦理委员会的批准并签署正式书面知情同意书。

1．2 研究方法

1．2．1 标 本 准 备 均于晨起空腹采肘静脉血 5mL，3 mL 普通管，以 2 000 r ／ min 离 心 2 min，取 上层血清－80 ℃低温保存，统一测定 FT3、FT4、TSH 和MDA；2 mL EDTA 抗凝，以 2 000 r ／ min 离 心 5 min用于分离淋巴细胞，测定 NF-κB P65 活性。

1．2．2 FT3、FT4、TSH 测 定 采 用 放 射 免 疫 法，应用 γ 计数仪（国营二六二厂，PS2008）测定 FT3、FT4和 TSH，FT3 试剂盒灵敏度为 0．1 p mol ／ L，特异性：抗 T3 血 清 与 T4、rT3、T1、T2 交 叉 反 应 率 均 ＜ 0．001，平均批内变异度 （CV） ＜ 10％， 平 均 批 间 CV ＜15％；FT4 试 剂 盒：灵 敏 度 为 0．58 pmol ／ L，特 异 性：抗 T4 血 清 与 T3、rT3、T4、T2，水 溶 酸 钠、阿 斯 匹 林 交叉反应 率 均 ＜ 1 × 10－4，平 均 批 内 CV ＜ 10％，平 均批间 CV ＜ 15％； TSH 试剂盒：灵敏度为 0．1 mIU ／ L，平均批内 CV ＜ 8．7％，平均批间 CV ＜ 10．9％。

1．2．3 MDA 测定 应用人 MDA 酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbnent assay， ELISA）快 速检 测 试 剂 盒 （购自上海恒远生物科技有限公司，MDA2003）测 定 血 清 MDA 水 平，依据试剂盒说明书进行操作。

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