常用免疫试剂的配制方法

常用免疫试剂的配制方法

1.抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2PBS
NaH2PO4.2H2O 0.39克
Na2HPO4 1.27克
NaCl 0.85克
NaN3 200mg
H2O （蒸馏水） 至 1000ml

2．DAB溶液配制：（组化及Western blot 显色）
称DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCl缓冲液100ml溶解，如有沉淀，过滤后使用，一般新鲜配制使用。
用前加入1%H2O2 1～1.5ml,H202浓度为0.01%，混匀后使用。

3．3，3，5，5，—四甲基联苯胺（TMB）溶液配制:
用二甲基甲酰胺（dimethylformamide,DMF）或无水乙醇，将TMB配成1%浓度，4 ℃ 保存半年以内使用。
使用前，用pH5.0磷酸—柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml（1mgTMB）1%TMB液，再按每毫升TMB加入1μl30% H2O2混匀后立即使用。
2N H2SO4终止后，450nm测定OD值。