M199基础培养基的配制步骤

M199基础培养基是 Morgan 等在 1950 年zui早开发的一种化学成份明确的基础培养基，zui早用于鸡胚心细胞的培养。目前在补充了血清后可用于病毒及疫苗的生产，也用于多种非转化的动物细胞生长。  

高压灭菌型是该培养基的热稳定配方，可保证其营养成份在高压高热中不受影响。该配方中不含L-谷氨酰胺及碳酸氢钠，需在高温灭菌后添加。  

产品型号  

M199基础培养基，含 L-谷氨酰胺，不含碳酸氢钠  

M199基础培养基，不含 L-谷氨酰胺，不含碳酸氢钠  

M199基础培养基，含 L-谷氨酰胺，含 HEPES，不含碳酸氢钠  

M199基础培养基，含 L-谷氨酰胺，含 HEPES,不含碳酸氢钠,含 Hank 盐  

M199 基础培养基，含 L-谷氨酰胺，不含酚红，不含碳酸氢钠  

M199 基础培养基，高压灭菌型，不含 L-谷氨酰胺，不含碳酸氢钠  

产品规格  

干粉（1L、10L 及 100L)； 液体（500 ml)  配制方法  

干粉培养基的过滤配制  

1. 将 1 升量的干粉在 950ml 细胞培养级纯净水中*溶解  
2. 加入 2 克碳酸氢钠，继续搅拌至*溶解  
3. 用 1N 盐酸或氢氧化钠调整到要求的 pH，将溶液定溶至 1000ml  
4. 在超净台内用 0.22um 滤膜正压过滤  
5. 将培养基在 2~8℃避光保存  

高压灭菌型的配制  

1. 将 1 升量的高压灭菌型干粉在 900ml 细胞培养级纯净水中*溶解  
2. 将溶液 pH 调至 4.0，并将溶液定溶至 960ml  
3. 在 121℃、15psi 高压消毒 5 分钟  
4. 将培养基迅速取出，避免过久加热引起成份分解或液体蒸发减少  
5. 待培养基冷却至室温后，无菌操作加入 29.3ml 的无菌 7.5%碳酸氢钠溶液，及 10ml 的无菌 200mM L-谷氨酰胺  
6. 如有必要，用无菌的 1N 盐酸或氢氧化钠调整 pH  
7. 将培养基在 2~8℃避光保存  

自备材料  

细胞培养级或注射级纯水  

7.5%碳酸氢钠溶液（无菌）  

200mM 谷氨酰胺溶液（无菌)  

1 N 盐酸溶液（无菌)  

1 N 氢氧化钠溶液（无菌)  

质检指标  

形状：淡黄色均匀粉末（干粉），澄清透明（液体）  

溶解：干粉按要求溶解后澄清透明  

pH 值：（加碳酸氢钠前）4.4-5.0（加碳酸氢钠后）(液体）7.4-8.0  

渗透压：（加碳酸氢钠前）230-270（加碳酸氢钠后）(液体）280-  320  

菌落：每克小于 100cfu (干粉），无菌（液体）  

细胞生长：正常（干粉及液体）  

储存及注意事项  

1. 所有液体及干粉培养基应在 2~8℃避光保存，并在有效期内使用。  
2. 不建议配制培养基浓缩液。部分氨基酸或盐会在高浓度下不溶解或沉淀。 
3. 液体培养基的 pH 储存时会因为二氧化碳的逃逸而发生改变。建议尽量减少开瓶次数。  
4. 灭菌后的液体培养基添加物应无菌，并在无菌操作下添加。  
5. 干粉培养基吸湿性强，极易吸水变质。包装打开后应全部使用或剩余舍弃。  

注意：本产品于研发生产使用