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新城疫实验室诊断

时间:2012-5-10阅读:1885
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对于该病的实验室诊断,传统的方法是进行病毒分离,然后用血凝和血凝抑制进行鉴定。尽管NDV只有一种血清型,但是不同毒株间的毒力差异很大。加上近年来新城疫弱毒活疫苗的广泛应用,仅从具有临床症状的病禽分离出病毒进行鉴定,还不能对ND作出确诊,因此需要对分离株的致病性进行评估,OIE根据*的病原毒力与病原分子结构间的关系建立的体外毒力鉴定技术,已经用于世界范围内新城疫病毒的调查。世界动物卫生组织(OIE)对报告ND暴发作丁下述定义:ND是由血清1型禽副黏病毒(APMV-1)引起的禽类感染,该APMV—1在毒力上符合下列两个标准中的一个:

①该病毒在1日龄雏鸡的脑内接种致病指数(1CPl)大于0.7;
②该病毒P1蛋白的N端(即117位残基)为苯丙氨酸(F),而F2蛋白的C端有多个碱性氨基酸(直接测序或从核苷酸序列推导)。所谓多个碱性氨基酸是指在113位和116位之间至少有3个精氨酸或赖氨酸残基。不能显示上述氨基酸残基的特征结构则需要对分离的病毒作ICPl试验。

根据OIE对NDV的这一定义,目前OIE确诊ND有两种方法:
一是分离鉴定NDV并进行生物学试验,测定分离NDV的MDT、ICPt和IVPI以确定其毒力;
二是采用基于RT-PCR的分子生物学方法,确定病原为NDV并确定其毒力。

因常规的病毒分离鉴定和用生物学试验确定毒力费时、费力、费钱,又要使用动物,已越来越不被人们所接受。在这种情况下,经过几年探索而日趋成熟的分子确诊方法,可以用来取代常规的确诊方法。近年来,随着分子生物学和免疫学技术的快速发展,越来越多的快速诊断方法在新城疫的检测方面得到广泛的应用,如RT-PCR技术、荧光RT-PCR技术、EIASA技术和胶体金标记的诊断技术等。
 

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