一．微量法检测：（利用酶标仪进行定量分析）

1. 将标准品工作液按0，5，10，15，20，25μl加入到96孔板的标准品孔中，不足25μl用水补足到25μl/孔。其它孔加入适当体积样品，不足25μl加水补足到25μl。

2. 根据样品数量，按50体积试剂A加1体积试剂B（50：1）充分混匀，配置成适量Lowry工作液。Lowry试剂工作液室温2小时内稳定。

3. 各孔加入Lowry试剂工作液125μl，振荡混匀，室温放置10分钟。

4. 向各孔加入试剂C12.5μl，立即混匀，室温放置30分钟。

5. 测定A500nm、A590nm、A650nm或A750nm，500-750nm之间的波长都可以接受。

6. 根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。

 常规法检测：

1. 取7支试管，在前6管分别加入标准蛋白质（250μg/ml）溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1ml，第7管加入1ml待测样品液，用双蒸水分别将每管的体积补充到1ml。

2. 向每管加入Lowry试剂工作液5ml混合，室温下放置10分钟后。

3. 向每管加入试剂C  0.5ml，每加一管立即混匀，室温放置30分钟。

4. 用分光光度计在波长650nm处，以第1管（不含蛋白质）对照调零，分别测定每管的光密度值。

5. 以每管的光密度值为纵坐标，每管的蛋白质量为横坐标作图，然后根据待测样品管的光密度值在坐标上查得其蛋白质含量。

上海恒远有更多为您详解的法测定蛋白浓度试剂盒，欢迎各位老师查看。http://www.shhykit.com/hysw-SonList-514051/