a.采用“HPLC"级溶剂
b.避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂
c.对试样有适宜的溶解度
d.化学稳定性要好
e.溶剂粘度要低
a.纯化水(娃哈哈纯净水,屈臣氏蒸馏水)
b.蒸馏水
c.去离子水
a.专门的纯水机或超纯水机:理想的HPLC水应为18.2MΩ的超纯水,并通过0.22um的滤膜,除去热源,有机物,无机离子等
b.去离子水重蒸
c.市场购买娃哈哈纯净水,屈臣氏蒸馏水
a.经过了蒸馏和0.45u的过滤(除纤维毛,未溶解的机械颗粒)
b.不含防腐剂和抗氧化剂
c.除去了有紫外吸收的杂质 常用溶剂及紫外截止波长
a.使用前必须过滤
b.使用前必须先用相同比例(甲醇比例相同)的甲醇水溶液冲洗柱子,防止缓冲盐的析出
c.使用后一定要进行清洗,以免造成腐蚀、磨损、阻塞:用高比例水相的甲醇水溶液冲洗40min(1mL/min),再用甲醇冲洗30min
d.用纯水冲洗泵头清洗管路
e.易受到细菌和霉菌的影响,最好现配现用
a.过滤掉流动相中固体颗粒和微生物,防止堵塞仪器和色谱柱
b.使用≤0.45um的过滤膜:水/水溶液---水系膜,有机溶剂---有机膜
现象:管路中不断有气泡生成
措施:采用异丙醇(或5%稀硝酸)超声波清洗,再用蒸馏水清洗
除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡
气泡对测定的影响: 泵中气泡使液流波动,改变保留时间和峰面积
柱中气泡使流动相绕流,峰变形
检测器中的气泡产生基线波动
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