全自动外泌体荧光检测分析系统
美国NanoView公司所开发的全自动外泌体荧光检测分析系统是款无需纯化的、全自动的可对单个外泌体进行表征分析的全新设备。该设备能够提供外泌体表征信息,包括外泌体粒径大小、计数、分布、携带蛋白表达、生物标志物(CD9,CD81,CD63等)共定位等。操作简单,结果可靠。经推出,便引起了外泌体域科研工作者的广泛关注,短短两年时间已有50多个实验室采用该技术,发表重要文献近百篇。
全自动外泌体荧光检测分析系统的基本原理是种基于异性免疫捕获技术,允许研究者直接分析定群体的外泌体或外囊泡。通过配套的试剂盒,客户次性能够分析多达9个不同的样本,大大节省了时间和经济成本。全自动外泌体荧光检测分析系统兼容各种生物样本,除了纯化的外泌体之外,对于血液、尿液、恶性肿瘤、腹水中的外泌体也可直接检测分析,大大拓展了研究范围。
应用方向及主要征
生物标记物共定位 可量化4种标记物的表达情况
| 计数分析 直接从样品中计算抗原阳性外泌体的数量,无需提纯
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粒径分析 高精度统计外泌体的颗粒大小及分布
| 检测外泌体内容物 使用ExoView Cargo试剂盒可探测外泌体内部核酸的装载情况,分析装载率
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荧光检测 具备3个荧光通道,能够探测单个蛋白的 结合
| 线性工作流程 9个样品的全自动分析
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无须纯化 无需担心纯化带来的误差,测量样品 间的表征和表达信息的差异
| 多重样本分析 可使用6种表面标记物来筛选外泌体
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ExoView™ Kit 配置清单:
ExoView™ Tetraspanin Kits
| CD9 - 捕获抗体 CD63 - 捕获抗体 CD81 - 捕获抗体 Mouse IgG 阴性对照 CD9、CD63、CD81三色共标记荧光抗体。
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ExoView™ Tetraspanin Plasma Kits
| CD9 - 捕获抗体 CD63 - 捕获抗体 CD81 - 捕获抗体 CD41a - 捕获抗体 多达三种定制化捕获抗体 同种阴性对照 CD9、CD63、CD81三色共标记荧光抗体。
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ExoView™ Tetraspanin Custom Kits
| CD9 - 捕获抗体 CD63 - 捕获抗体 CD81 - 捕获抗体 多达三种定制化捕获抗体 同种阴性对照 CD9、CD63、CD81三色共标记荧光抗体。
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ExoView™ Cargo Kits
| 兼容所有ExoView Kit 标准 CD9, CD63和CD81 捕获抗体 Mouse IgG 阴性对照 ExoView Cargo 试剂 CD9、CD63、CD81三色共标记荧光抗体。 Sytenin荧光抗体
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粒径分析
全自动外泌体荧光检测分析系统能够对>50 nm的外泌体进行全方面的表征,无论是粒径尺寸、粒径分布还是外泌体的亚型均可在次测试中得到。并且所用来测试的样本无需进行纯化,避免因纯化带来的样本偏差。
分析不同大小和不同尺度的外泌体亚群,在CD171过表达系统中,100 nm以上的外泌体仅表达了CD171。
量化外泌体亚群
通过抗体捕获的模式,全自动外泌体荧光检测分析系统能够量化含有不同标记物的外泌体亚群,并对不同种群的外泌体进行异性计数和分析。整个过程无需纯化,并且线性范围可跨越3个数量。
TSPAN8阳性细胞外囊泡的稀释曲线。使用1:3比例的梯度稀释。用R2 = 0.9986计算与TSPAN8荧光数据的线性拟合。
检测外囊泡中的装载物
MISEV建议在表征外泌体和外囊泡时,应当同时测量表面和载体蛋白。使用ExoView芯片可穿透外泌体,探测膜内蛋白和载体。并且单次可定量3种表面、管腔蛋白。
检测细胞外泌体内的Syntenin。
WT细胞在未穿膜的条件下几乎观测不到Syntenin的信号。进行穿膜处理后可以观测到Syntenin信号,而KO之后信号消失
生物标志物共定位
全自动外泌体荧光检测分析系统能够在单个外泌体样本上检测多达4种标记物,并同时提供外泌体的其它表征数据诸如计数、颗粒尺寸统计等。
无需纯化
全自动外泌体荧光检测分析系统只测量含有靶标抗原的定细胞外泌体群体。仅需35ul的稀释样品,即可直接获得外泌体的表型、l粒径和计数信息。并且无需担心污染物对测试的影响。
无论纯化与否,Exoview均可进行分析
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2020年已发表文献