血磷浓度检测试剂盒说明书

微量法

注意：正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。

规格：100T/96S

测定意义：

血磷主要指血中的无机磷， 以无机磷盐的形式存在。血浆中钙、磷浓度关系密切，在以 mg/dL表 示时，二者的乘积(  [Ca] ×  [P] )为 30~40 。当(  [Ca] ×  [P] )>40 ，则钙和磷以骨盐形式沉积于骨 组织；若(  [Ca] ×  [P] )<35 则妨碍骨的钙化，甚至可使骨盐溶解，影响成骨作用。血钙和血磷含量 的相对稳定依赖于钙、磷的吸收与排泄和钙化及脱钙两种代谢的相对平衡。上述平衡受到维生素 D3 、 甲状旁腺素和降钙素等激素的调节。

测定原理：

去除血清中有机磷后，无机磷盐与钼酸铵试剂生成磷钼酸，被硫酸亚铁还原后呈蓝色，在620nm 有光吸收；通过测定620nm吸光度，计算血液中磷含量。

自备仪器和用品：

离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馏水。 试剂组成和配置：

试剂一：液体×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。  临用前配制，依次加入11mL蒸馏水充分溶解，再加入试剂二，充

分混合。

标准液：液体×1 支，1mmol/L无机磷，4℃保存。

血磷浓度测定操作：

1. 分光光度计/酶标仪预热30min 以上，调节波长到620nm ，蒸馏水调零。

2. 取出标准液，室温解冻。

3. 血清预处理： 吸取50μL血清，加950μL试剂一，混匀后室温8000rpm ，离心10min ，取上清液，待 测。

4. 空白管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50μL蒸馏水，50μL试剂一，100μL试剂 三，混匀后静置10min ，于620nm测定吸光度，记为A空白管。

5. 标准管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50μL标准液，50μL试剂一，100μL试剂 三，混匀后静置10min ，于620nm测定吸光度，记为A标准管。

6. 测定管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50μL上清液，50μL试剂一，100μL试剂

三，混匀后静置10min ，于620nm测定吸光度，记为A测定管。

注意：空白管和标准管只需测定一次。

血磷浓度计算：

血磷含量 ( mmol/dL) =[C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)]× 样品稀释倍数 ×V 样总=2×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)

C 标准液：1 mmol/L；样品稀释倍数：  (50μL血清+950μL试剂一) ÷50μL血清=20。

注意事项：

1 、 试剂三需临用前配制，如未用完，4℃保存，最多可使用3天；

本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！

2 、 测定过程中，应尽量避免溶血，因为红细胞中有机磷酯进入血清后可被酶水解而使得血 清无机磷含量增高。

3 、 最低检出限为0. 1mmol/L。

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