组织铁含量检测试剂盒说明书

可见分光光度法

货号：BC4350

规格：50T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1、 试剂一：临用前配制，取1瓶加入7.5 mL蒸馏水充分溶解，试剂一变黑后则不能使用，2-8℃保存一周；

2、 试剂二：临用前配制，取1瓶加入375 μL冰 醋 酸，加入12 mL蒸馏水充分溶解；溶解后2-8℃保存一周；

3、 标准液：1 μmol/mL Fe³⁺标准液。

4、 标准溶液的稀释：临用前取100μL 1 μmol/mL Fe³⁺标准液，加入700μL蒸馏水，充分混匀，配制成0.125 μmol/mL的标准溶液进行实验，现用现配。（实验中每管需要400μL，为减小实验误差，故配制大体积。）

产品说明：

铁是人体必须的微量元素之一，它是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的主要成分，帮助氧的运输，促进脂肪氧化。缺乏铁元素容易造成贫血、代谢纷乱，并影响机体的免疫功能。

技术指标：

低检出限：0.00009449 μmol/mL

线性范围：0.0039-0.25 μmol/mL

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、氯仿、冰乙酸、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。4000g 4℃离心10分钟，取上清。

二、测定步骤

1. 可见分光光度计预热30min，波长调至520nm。蒸馏水调零。

2. 加样表：

三、组织铁含量计算

1．按组织质量计算

组织铁含量（μg/g 质量）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷W=6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷W

2．按组织蛋白浓度计算

组织铁含量（μg/mg prot）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷（Cpr×V提取）

=6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr

C标准液：0.125μmol/mL Fe³⁺标准液；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；V提取：提取液体积，1mL；55.845：Fe的相对分子质量，55.845μg/μmol。

注意事项：

1、 当ΔA大于0.9 时，建议将样本用提取液稀释后进行测定；ΔA过小时，可增加加入的样本体积来测定。

2、 试剂一溶解变黑后则不能使用；试剂二有毒性，做好防护措施。

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