目录:北京索莱宝科技有限公司>>染料/染色剂>>染色液>> 碱性磷酸酶染色液 (偶氮偶联法)
碱性磷酸酶染色液 (偶氮偶联法)
产品简介 :
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称 ALP 或 AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需适 PH 9.2-9.8。 此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、 附睾上皮之静纤毛、 肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血
管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮溶酶体、中性粒细胞
之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法) ,其原理是在 PH 9.2-9.8 的碱性条件下,细胞内碱性磷酸酶可使 AB-BI 磷酸盐水解,释放出磷酸和萘酚,后者与偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。该染液专门用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈红色,位于胞浆,结果较金属盐沉淀法可靠。
产品组成 :
名称 规格 4×10ml 4×20ml Storage
试剂(A): ALP 固定液 10ml 20ml RT 避光
B1:AS-BI 染色液 5ml 10ml -20℃ 避光 试剂(B):ALP 孵育液
B2:FBB 染色液 5ml 10ml 4℃ 避光
临用时,取 B1:B2 =1:1 比例混合,即为 ALP 孵育液,即配即用。
试剂(C): 苏木素染色液 10ml 20ml 4℃ 避光
试剂(D):甲基绿染色液 10ml 20ml RT 避光
使用说明书 1 份
准备材料 :
1、载玻片、湿盒
2、普通光学显微镜
操作步骤 ( 仅供参考 ):
1、 血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片入 ALP 固定液固定 3min(梯度入水后的
石蜡切片无固定) ,水洗。
2、滴加配置好的 ALP 孵育液,放入湿盒中,避光孵育 15-20min,水洗。
3、苏木素染色液复染 5-8min 或甲基绿染色液复染 3-5min。
4、水洗、镜检或甘油明胶封固后镜检。
染色结果 :
普通光学显微镜:
ALP 活性部位 红色
细胞核 蓝色(苏木素)或绿色(甲基绿)
血液、骨髓涂片结果判断:
细胞分值 染色特点
0 无颗粒
1 稍有颗粒
2 中等程度颗粒
3 多数颗粒
4 充满颗粒
临床意义:
1、 类白血病反应积分明显增高,未经治疗的慢性粒细胞白血病积分明显减低。
2、 急性细菌性感染积分明显增高,病毒性感染积分多正常或减低。
3、 再生障碍性贫血积分常增高,PNH、MDS 积分常减低。
注意事项 :
1、血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,厚薄适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。
2、ALP 孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
3、复染时,苏木素染色液或甲基绿染色液二者取其一。
4、每次染色时,应有阳性对照片。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期 :6 个月