1．应用PCR技术检测蜡样芽孢杆菌

    王振国、刘金华等利用PCR技术检测致病性蜡样芽孢杆菌，对致病性蜡样芽孢杆菌溶血素hblA基因序列进行分析，设计一对特异引物，通过优化PCR反应条件，来实现对致病蜡样芽孢杆菌的快速检测，结果是该方法具有较强的灵敏性及特异性，能够对肠毒素型蜡样芽孢杆菌进行有效的检测，其zui低检出限可达9CFU／m1，用PCR技术对食物样品中致病性蜡样芽孢杆菌的检测取得与普通生化检测方法一致的结果。结果证明利用PCR技术对食品中蜡样芽孢杆菌的检测较常规的生化检测方法具有省时省力的特点且灵敏性较高，具有较强的实际应用价值

 

    胡玉山、江丽芳、洪帮兴等运用UP-PCR技术进行食源性感染常见致病菌Hsp60基因的扩增与酶切鉴定，采用UP-PCR法扩增其Hsp60基因，并对PCR产物进行酶切鉴定分析。结果对13种食源性感染常见致病菌均可以扩增出约1．1kb的基因片段，蜡样芽孢杆菌PCR产物经HindⅢ酶切后形成约684bp和470bp片段，小肠结肠炎耶尔森菌PCR产物经BglⅡ酶切后形成861bp和296bp片段。

 

    王振国、刘金华、徐宝梁等应用实时荧光PCR检测致病性蜡样芽孢杆菌，他们利用SYBRGeen工染料能与双链DNA结合发出荧光的特点，建立了一种用来检测致病性蜡样芽孢杆菌（兄cereus）的实时PCR。该方法对致病性蜡样芽孢杆菌致病相关基因cereolysisAB基因序列进行分析，设计1对特异引物，通过对SYBRGeenI实时PCR反应条件的优化，实现对致病性蜡样芽孢杆菌的检测。结果是该方法具有较强的灵敏性及特异性，能够对致病性蜡样芽孢杆菌进行有效检测，其zui低检出限可达8CFU／ml。利用该技术检测蜡样芽孢杆菌，较常规的生化检测方法具有省时省力的特点，且灵敏性较高，具有实际应用价值。

 

    2．应用寡核苷酸芯片技术检测蜡样芽孢杆菌

    洪帮兴、江丽芳、胡玉山等应用寡核苷酸芯片技术检测食源性感染常见致病菌。方法为利用带正电荷尼龙膜为芯片载体，合成寡核苷酸探针，点样于载体制成寡核苷酸芯片，对食源性感染常见致病菌23SrDNA基因片段扩增产物进行杂交检测。结果表明在同一条件下运用设计的通用引物扩增出16种（属）细菌23SrDNA基因片段。大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、变形杆菌、单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽孢杆菌、肉毒梭菌和空肠弯曲菌等10种（属）菌杂交结果显示具有高灵敏度和特异性；金黄色葡萄球菌、链球菌、小肠结肠炎耶尔森菌和产气荚膜梭菌等4种（属）菌，未能显示预期的种（属）杂交结果；而应用食源性感染模拟标本，检测肺炎链球菌和铜绿假单胞菌这两种与食源性感染无关的致病菌时未与芯片上探针出现杂交反应，检出水平可达10CFU／m1。建立的寡核苷酸芯片技术在食源性感染常见致病菌的检测上快速准确等优点，为食源性感染的诊治与预防提供了有效的技术手段和方法依据。