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免疫荧光技术(IFT)诊断禽流感

阅读:394          发布时间:2010-12-30

  免疫荧光技术就是荧光抗体技术(FAT)。IFTzui早用于病毒的鉴定和定位病毒感染细胞中特异性抗原,主要是核内荧光。用M1抗原的荧光抗体主要出现胞质荧光,核内也有部分荧光。

 
    IFT早在1961年就开始用于人类流感的快速诊断,1984年宾夕法尼亚州暴发禽流感时Skeeles将IFT用于AIV的检测。用于禽流感病毒的诊断常用直接荧光抗体法,即在组织触片上直接染色、以荧光显微镜检查荧光。一种AIV的荧光抗体可用来检测不同亚型的其他病毒。IFT用于禽流感的诊断具有快速、简便和敏感性好的特点,而且检测成本费用相对较低,其敏感度与病毒的分离鉴定相当,有时高于用鸡胚进行的病毒分离。但是需要注意的是如何避免和降低标本中出现的假阳性(即非特异性荧光)问题。
 
    对一株杂交瘤细胞分泌的流感病毒的单克隆抗体进行检测时,发现间接固相免疫荧光技术的敏感性比HI高40~150倍。间接免疫荧光技术也可以用来检测核蛋白(N尸)和基质蛋白(M1)抗原与抗体的反应,其敏感性很高。该反应对抗原制备要求较高,需用非离子型去污剂对纯化的病毒粒进行裂解。
 
    由于单克隆抗体的问世,大大提高了免疫荧光测定的效果。免疫荧光用于禽流感的诊断具有快速(2h之内)、特异和敏感性高的特点,但是其不能鉴别HA和NA亚型,而且需要特殊的设备(荧光显微镜),且工作人员需具有一定的经验,所以在基层检测单位推广应用具有一定的局限性。

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