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炭疽杆菌保守基因的特征及其应用

阅读:455          发布时间:2010-12-9

保守基因序列的特异性是不同微生物种属的重要标志,如核糖体RNA、rpoB基因、gyrB基因等。核糖体RNA基因具有较高的保守性,其微小变异为微生物的分类和鉴定提供了相关依据。蜡状芽孢杆菌属不同杆菌间16SRNA、23SRNA序列高度相似,不能充分反映炭疽杆菌和其他杆菌间的差异。

 
    rpoB是RNA聚合酶p亚单位编码基因,具有较高的保守性,不同杆菌的rpoB序列特征比较一致,炭疽杆菌rpoB基因至少存在4个稳定的变异位点。在研究早期,Patra等发现炭疽杆菌基因组特异性序列BA813(位于rpoB内部)能够区分炭疽杆菌和其他杆菌,可以用于分子诊断。根据变异位点序列特征,Qi等成功地设计了FRET荧光探针实时定量PCR检测体系。Levine等利用该序列成功检测出福尔马林固定组织的炭疽杆菌。但也有人报道,利用BA813序列设计的检测体系与其他杆菌存在交叉反应。
 
    gyrB基因是DNA拓扑酶U(topoisomeraseⅡ)的ATP酶区域的编码序列,长约2kb。通过序列比较和DNA杂交发现,炭疽杆菌gyrB基因序列比16SrRNA更加具有自身特点,可以作为诊断标志性序列。这些高度保守基因序列基本一致,但少数位点上存在稳定变异。因此,利用这些序列作为炭疽杆菌检测的标志,对检测引物或探针的设计要求比较严格,同时也增加了出现假阳性结果的可能。此外,16-23SRNAs及拓扑异构酶A、拓扑异构酶B亚单位编码基因间隔序列分析,对于诊断和鉴定炭疽杆菌亦有重要价值。
 

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