副流感病毒IgG/IgM ELISA检测试剂盒

【产品名称】

通用名称：副流感1/2/3 IgG ELISA试剂盒

英文名称： Parainfluenza 1/2/3 IgG ELISA

【产品规格】

96T

【预期用途】

副流感病毒IgG抗体检测试剂盒，此酶免试剂盒可用于人血清中抗副流感病毒1/2/3 IgG抗体的体外定性和定量检测。

【前言简介】

副流感病毒感染是一种通过空气传播并在各个地域都会出现的传染病。副流感病毒在1岁大婴儿中的血清学流行率为50%。副流感病毒的典型特征是频繁的再感染,副流感病毒3的主要特征为：其潜伏期为2-6天。副流感病毒是副粘病毒的一个亚种。它和呼吸道合胞病毒(RSV)一起属于呼吸道疾病的主要病毒性病原体，并且这种呼吸道感染会伴随有严重的临床症状。在成年人中，副流感病毒会引起严重的鼻咽炎。副流感病毒感染开始的症状表现为突然间的头疼、肌肉疼痛和关节痛，接下来就出现38-39°C的高烧。如果下感染了下呼吸道，则又会出现气管支气管炎的症状：声音嘶哑和干咳。在新生儿中，副流感病毒1会引起严重的肺炎，主要表现为高烧、黄萎病、呼吸困难和脓血痰。有时候还会出现脑膜炎的症状。在婴儿和儿童中，副流感病毒2经常会引起急性喉气管支气管炎和假格鲁布。它首先表现为鼻黏膜炎的症状，之后出现呼吸困难、干咳和呼吸急促。副流感病毒3被认为是引起肺炎和细支气管炎的主要病原体。副流感病毒1/2/3分布于全球各个地方都存在，而副流感病毒4仅出现在美国。流感病毒1和流感病3的感染一年四季都会出现，而流感2和4的感染只是偶尔出现。副流感病毒的实验室检测方法有血细胞凝集检测、补体结合实验和中和实验。新方法有IFA和ELISA，它们可以鉴别出病人血清中的IgG和IgA抗体。在鉴别诊断中，由于交叉反应，我们必须进行麻疹病毒、船运热病毒和猿病毒5等副粘病毒的检测。

【检测原理】

副流感病毒IgG抗体检测试剂盒，此固相ELISA试剂盒利用的夹心法原理。包被板上包被了抗原。用对人IgG具有特异性的酶标二抗来检测结合到包被抗原的样品特异性抗体。底物反应后，所显示的颜色强度与检测到的IgG特异性抗体的量成正比。样品的结果可直接使用标准曲线得。

实验步骤

1) 加100µL标准品和已稀释样本于相应反应孔中，在定性检测中只使用标准品B。

2) 封板后室温（18℃-25℃）温育60分钟。

3) 移去粘性金属板，弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。

4) 在每一微孔中加入100µL酶联物。

5) 封板后室温（18℃-25℃）温育30分钟。

6) 移去粘性金属板，弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次，在吸水纸上拍干。加底物液和终止液时，如果有条件的话，可使用8孔微量移液器。确保底物液和终止液都是相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生。

7) 每孔加TMB底物液100µL。

8) 室温（18℃-25℃）避光温育20分钟。

9) 在每一微孔中加入100µL TMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动包被板以使试剂混合均匀。此时，颜色蓝色变成黄色。

10) 加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。

【结果计算】

在半对数坐标纸上或用自动生成的方法，以标准品的OD值为Y轴，浓度为X轴，绘制一标准曲线图。用立体图、4参数对数图或对数-对数图都可获得良好的实验结果。对于标准曲线图，用标准品的每一单值进行计算（样品结果明显异常的值必须删除掉，应使用更加合理的单值）。样品的浓度可直接从标准曲线上获得。一旦样品稀释了，就应当乘以相应的稀释因子。如果样品所测得的浓度高于最高标准，则应根据实验前的准备说明所述对样品进行稀释，并重新检测。

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