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ELISA法测定肺炎衣原体实验步骤

时间:2014-10-21阅读:756
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ELISA试剂盒实验中所需要用到的试剂:

1、浓缩酶联物; 5、弱阳性对照;
2、标本稀释液; 6、预包被微孔板;
3、终止液; 7、底物A、B;
4、阳性对照; 8、阴性对照。

ELISA试剂盒实验检验过程:
1、配制洗涤液 l瓶浓缩洗涤液加475ml蒸馏水。配好的洗涤液短期内可置室温环境中,长期可存于2—8℃环境中。
2、配制酶联物 按1:101倍稀释,即取1u1浓缩酶联物加酶联物稀释液1 000ul(根据检测标本数量确定稀释量),未用完的丢弃。
3、待试剂盒平衡至室温后,待测标本按1;51稀释,即取4tA血清与200u1标本稀释液混合。
4、将稀释标本置37℃环境中20min。
5、各加100ul阳性、弱阳性、阴性对照及已稀释待测标本上清液于相应孔中,空白对照孔加100u1标本稀释液,盖好反应板,置37℃环境中30min。
6、甩尽板中液体,每孔用200~300ul洗涤液洗5次,每次均需拍干。
7、每孔加酶联物100~1,盖好反应板,置37℃环境中30min。
8、甩尽板中液体,洗5次,每次拍干。
9、加底物A、B各1滴或各50tzl,混匀,置37℃环境中15min。
10、取出,加终止液1滴,用酶标仪450nm测其OD值。若肉眼观察则不加终止液,直接判断结果。
实验过后,我们要做一个结果判断:
1、阴性对照平均OD值须小于0.20。
2、弱阳性对照平均OD值须在0.20—0.65。
3、弱阳性对照与阴性对照的平均OD值之比须≥2。符合以上3个条件时,本试验结果可信,否则重复实验。
4、若待测标本孔显色比弱阳性对照孔深则判为阳性,反之为阴性。但在弱阳性对照值上下10%范围内再测1次,如确实高于弱阳性对照则可判为阳性。

E-(Hu)(03)-06688 人T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗体elisa试剂盒 ,英文名: HTLV-Ⅰ/II antibody ELISA kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(03)-06689 人T细胞表面糖蛋白CD1a(CD1A)elisa试剂盒 ,英文名: CD1A ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(03)-06690 人U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)elisa试剂盒 ,英文名: SNRPA ELISA kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(03)-06691 人UV切除修复蛋白RAD23同源物A(RAD23A)elisa试剂盒 ,英文名: RAD23A ELISA kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(03)-06692 人vav3鸟嘌呤核苷酸交换因子(VAV3)elisa试剂盒 ,英文名: VAV3 ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(03)-06693 人v-rel禽网状内皮细胞过多症病毒癌基因同源物B(RelB)elisa试剂盒 ,英文名: RelB ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(03)-06694 人Wnt-3a蛋白(WNT3A)elisa试剂盒 ,英文名: WNT3A ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(03)-06695 人Z-DNA结合蛋白1(ZBP1)elisa试剂盒 ,英文名: ZBP1 ELISA KIT ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(03)-06696 人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)elisa试剂盒 ,英文名: Interferon α/βReceptor,IFN-α/βR ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(03)-06697 人α1防御素(DEFA1)elisa试剂盒 ,英文名: DEFA1 ELISA kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(03)-06698 人α2-HS糖蛋白(AHSG)抗体elisa试剂盒 ,英文名: AHSG antibody ELISA Kit ,规格: 48T/96T
E-(Hu)(03)-06699 人α2抗纤溶酶(α2-AP)elisa试剂盒 ,英文名: α2-Antiplasmin,α2-AP ELISA Kit ,规格: 48T/96T

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