免费代测人 （Human） 血小板活化因子乙酰水解酶 （PAFA） ELISA 检测试剂盒

人 (Human) 血小板活化因子乙酰水解酶 (PAFA) ELISA 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用  标本：血清或血浆

试验原理：
PAFA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知PAFA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将PAFA和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PAFA的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制
试剂盒成份（2-8℃保存）    96孔配置    48孔配置    配制
96/48人份酶标板    1块板（96T）    半块板（48T）    即用型
塑料膜板盖    1块    半块    即用型
标准品：1600U/L    1瓶（0.6ml）    1瓶（0.3ml）    按说明书进行稀稀
空白对照    1瓶（1.0ml）    1瓶（0.5ml）    即用型
标准品稀释缓冲液    1瓶（5ml）    1瓶（2.5ml）    即用型
生物素标记的抗PAFA抗体    1瓶（6ml）    1瓶（3.0ml）    即用型
亲和链酶素-HRP    1瓶（10ml）    1瓶（5.0ml）    即用型
洗涤缓冲液    1瓶（20ml）    1瓶（10ml）    按说明书进行稀释
底物A    1瓶（6.0ml）    1瓶（3.0ml）    即用型
底物B    1瓶（6.0ml）    1瓶（3.0ml）    即用型
终止液    1瓶（6.0ml）    1瓶（3.0ml）    即用型
标本稀释液    1瓶（12ml）    1瓶（6.0ml）    即用型

自备材料
蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项
试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂的准备
标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：
1600 U/L    （6号标准品）    原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
800 U/L    （5号标准品）    100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
400 U/L    （4号标准品）    100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
200 U/L    （3号标准品）    100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
100 U/L    （2号标准品）    100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
50 U/L    （1号标准品）    100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 U/L    （空白对照）    原始浓度不用稀释直接加入50ul。

洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

人 (Human) 血小板活化因子乙酰水解酶 (PAFA) ELISA 检测试剂盒操作步骤
使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

建议使用的实验方案
    标准品浓度（U/L）    
A    1600    1600    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品
B    800    800    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品
C    400    400    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品
D    200    200    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品
E    100    100    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品
F    50    50    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品
G    0    0    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品
H    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品    样品

局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

试剂盒性能
1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

人 (Human) 血小板活化因子乙酰水解酶 (PAFA) ELISA 检测试剂盒结果判断与分析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的PAFA标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的PAFA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围：0-1600U/L
4、敏感度： 1.0 U/L
A02242    大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02243    大鼠前列腺素F2α(PGF2α)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02244    大鼠白三烯E4(LTE4)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02245    大鼠尿激酶(UK)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat urokinase,UK ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02246    大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02247    大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02248    大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02249    大鼠载脂蛋白H(Apo-H)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat Apolipoprotein H,Apo-H ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02250    大鼠白介素2受体(IL-2R)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02251    大鼠肾上腺髓质素(ADM)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat adrenomedullin,ADM ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02252    大鼠β内啡肽受体(β-EPR)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02253    大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2(CAMK 2)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ,CAMK 2 ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02254    大鼠肝脂酶(HL)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat hepatic lipase,HL ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02255    大鼠烟碱型乙酰胆碱受体(N-AChR)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat nicotinic acetylcholine receptor,N-AChR ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02256    大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02257    大鼠活化蛋白C(APC)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat activated protein C,APC ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02258    大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat galanin,GAL ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02259    大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02260    大鼠破骨细胞分化因子(ODF)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat osteoclast differentiation factor,ODF ELISA Kit     ，规格：    96T/48T
A02261    大鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit     ，规格：    96T/48T
A02262    大鼠钩端螺旋体IgG(Lep IgG)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat Leptospira IgG,Lep IgG ELISA Kit     ，规格：    96T/48T
A02263    大鼠热休克因子1(HSF1)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit     ，规格：    96T/48T
A02264    大鼠β羟丁酸(βOHB)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA Kit     ，规格：    96T/48T
A02265    大鼠细胞色素P450(CYP450)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat cytochrome P450,CYP450 ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02266    大鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit     ，规格：    96T/48T
A02267    大鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit     ，规格：    96T/48T
A02268    大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA Kit     ，规格：    96T/48T
A02269    大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat transforming growth factorsβ2,TGFβ2 ELISA Kit     ，规格：    96T/48T
A02270    大鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat cytochrome P450 2E1,CYP2E1 ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02271    大鼠α1微球蛋白(α1-MG)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat α1-microglobulin,α1-MG ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02272    大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit     ，规格：    96T/48T
A02273    大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat peroxisome prolifeRators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA Kit    ，人 (Human) 血小板活化因子乙酰水解酶 (PAFA) ELISA 检测试剂盒规格：    96T/48T
A02274    大鼠钙调素(CAM)酶联免疫试剂盒     ，英文名：    Rat calmodulin,CAM ELISA Kit     ，规格：    96T/48T
A02275    大鼠载脂蛋白E(Apo-E)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat Apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit    ，规格：    96T/48T
A02276    大鼠网膜素(omentin)酶联免疫试剂盒    ，英文名：    Rat omentin ELISA Kit    ，规格：    96T/48T