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小鼠ELISA试剂盒饭胶原酶I(Collagenase I)的说明书

时间:2014-1-22阅读:597
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小鼠ELISA试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的抗原抗体结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中待测物质的浓度。
试剂盒组成

标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠ELISA试剂盒操作步骤
1)标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2)加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3)温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4)配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5)洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6)加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
 

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