详细介绍
操作程序
- 加样反应:取出所需量的反应板条,每孔加样本稀释液(5号液)2滴,再分别加入待检的血清样本10ul,混匀。同时设阴性、阳性及空白对照各一孔;阴性、阳性对照不用再稀释,直接加样100ul即可,空白对照孔仅加入样本稀释液(5号液)2滴。37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,每孔加洗涤液(2号液)1滴,立即用蒸馏水注满,静置30秒后甩去,再直接用蒸馏水洗涤四次,甩去,拍干。
- 加酶反应:除空白对照孔外其余每孔加酶结合物(1号液)2滴,37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。
- 显色反应:加底物(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃下避光显色10分钟。加终止液(6号液)1滴,混匀,终止反应(加终止液后蓝色会变为黄色)并判读结果。
结果判断
- 肉眼观察:阴性对照接近无色,阳性对照呈明显黄色,表示试验有效。待检孔接近无色表示该标本为阴性,待检孔呈明显黄色表示该标本为阳性。
- 仪器判断:以空白对照调零用酶标仪于450nm(620nm作参比波长)读取O.D值,待检孔O.D值大于阴性对照2.1倍者为阳性。当阴性对照O.D值低于0.05时按0.05计算。