赛默飞色谱及质谱
新型离子交换色谱柱在pH梯度下检测 不同类型的双特异性抗体
检测样品:药物检测项目:双特异性抗体
方案概述:本文使用新型离子交换色谱柱ProPacEliteWCX5μm4.0mmX150mm色谱柱和CX-1Buffer缓冲液,进行pH梯度高分辨率分析非对称型双特异性抗体和对称型的IgG类抗体,使用MAbPacSCX-10RS5um4.6mmX50mm色谱柱和CX-1Buffer缓冲液。
双特异性抗体作为一类双靶点药物,是近年来热门的研发领 域之一,因生产工艺的差异使得其在电荷异构体分析中更具有 挑战性,常规的盐梯度方法很难较好的分离出酸碱变异体,本 文使用商品化的CX-1 Buffer在弱阳离子交换柱ProPac Elie WCX 和强阳离子交换柱MAbPac SCX-10 RS 柱子上可以实现较好的 分离,且该方法只需要将流动相稀释10倍,或者添加少量的 NaCl就可以实现较好的分离。本文中研究的非对称IgG型双抗, 对称IgG型双抗和片段型双抗在该方法下都可以实现酸碱变异 体的较好的分离,是一种快速方便的双特异性抗体电荷异构体 分析平台方法。该方法为双特异性抗体的表征和质量控制提供 了新的解决方案。
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