上海喆图科学仪器有限公司
饲料细菌总数及致病菌检测验证 —— 生化培养箱应用
检测样品：饲料
检测项目：细菌总数及致病菌
方案概述：本次实验在生化培养箱提供的稳定 36℃ 环境下，成功完成了饲料中细菌总数及致病菌的检测。结果显示该批次饲料细菌总数符合 GB 13078 ，且未检出大肠杆菌与沙门氏菌，判定为合格。
一、实验目的
菌落总数测定：依据 GB 4789.2，检测配合饲料中的需氧菌总量，评估原料新鲜度与生产环境卫生水平。
致病菌筛查：依据 GB 4789.3 与 GB 4789.4，定性/定量检测大肠杆菌与沙门氏菌，排查饲料源性致病风险。
设备性能验证：生化培养箱在频繁开关门取样工况下的温度稳定性与箱内均匀性，确保菌落计数结果的重复性与合规性。
二、实验材料与设备
样品：肉鸡配合饲料（粉状，市售）
培养基：平板计数琼脂（PCA，细菌总数）、结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA，大肠杆菌）、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD，沙门氏菌）。
核心设备：生化培养箱（LCD 液晶屏，双传感器，强制对流，控温范围 0~65℃，精度 ±0.5℃）。
辅助设备：超净工作台、高压灭菌器、均质器、恒温水浴锅、无菌培养皿、移液枪。
三、实验步骤（SOP）
1. 样品制备（无菌操作）
称取 25 g 饲料样品，加入 225 mL 无菌生理盐水（0.85% NaCl），用拍击式均质器均质 2 min，制成 1:10 的样品匀液。
依次进行 10 倍梯度稀释（10⁻¹ ~ 10⁻⁴），选择合适的稀释度（如 10⁻³、10⁻⁴）进行倾注培养。
2. 细菌总数测定（GB 4789.2）
选择 2~3 个适宜稀释度，每个稀释度吸取 1 mL 样品匀液于无菌平皿。
倒入 15~20 mL 冷却至 46℃ 的 PCA 培养基，立即混匀。
待琼脂凝固后，翻转平皿，放入生化培养箱，设定 36 ± 1℃，培养 48 ± 2 h。
3. 大肠杆菌检测（GB 4789.3）
吸取 1 mL 适宜稀释度样品匀液于无菌平皿，倒入 VRBA 培养基混匀。
凝固后加 3~4 mL VRBA 覆盖表层（防蔓延）。
翻转平皿，放入 生化培养箱，36 ± 1℃，培养 24 ± 2 h。观察紫红色菌落，进行复发酵确证。
4. 沙门氏菌检测（GB 4789.4）
前增菌：称取 25 g 样品加入缓冲蛋白胨水（BPW），36℃ 培养 8~18 h。
选择性增菌：转接至 RV 肉汤和 TTB 肉汤，42℃（RV）和 43℃（TTB）培养 18~24 h。
分离培养：划线接种于 XLD 琼脂平板，放入 ZSH 生化培养箱，36 ± 1℃，培养 24 ± 2 h。观察粉红色带黑心菌落。
5. 设备性能监测
在培养箱内上、中、下层及四角放置留点温度计，记录开关门取样瞬间及恢复后的温度，验证温度恢复速度。
四、数据分析
1. 微生物计数结果
| 检测项目 | 培养条件 | 典型菌落特征 | 测定结果 (CFU/g) |
| 细菌总数 | 36℃, 48h | 灰白色、湿润、圆形菌落 | 2.3 × 10⁴ |
| 大肠杆菌 | 36℃, 24h | VRBA 上紫红色菌落，带沉淀环 | < 10 (未检出) |
| 沙门氏菌 | 36℃, 24h | XLD 上粉红色菌落，中心黑色 | 未检出 |
结论
检测结果有效性：本次实验在生化培养箱提供的稳定 36℃ 环境下，成功完成了饲料中细菌总数及致病菌的检测。结果显示该批次饲料细菌总数符合 GB 13078 ，且未检出大肠杆菌与沙门氏菌，判定为合格。
设备性能性：生化培养箱表现出优异的温度均一性和抗干扰能力。其强制对流系统确保了箱内，双传感器控温有效防止了误判。对于饲料检测实验室而言，这意味着即使实验员频繁开关门取样，设备也能迅速回稳，降低了对微生物生长的干扰，保障了数据的准确性与重现性。
应用价值：该设备不仅适用于常规的菌落总数测定，其稳定的温场环境也非常适合沙门氏菌等慢速生长菌的分离培养，是饲料企业QC 实验室、第三方检测机构及农牧科研院所进行微生物安全检测的可靠保障。
相关产品清单
温馨提示：
1.本网展示的解决方案仅供学习、研究之用，版权归属此方案的提供者，未经授权，不得转载、发行、汇编或网络传播等。
2.如您有上述相关需求，请务必先获得方案提供者的授权。
3.此解决方案为企业发布，信息内容的真实性、准确性和合法性由上传企业负责，化工仪器网对此不承担任何保证责任。
