干燥培养两用箱用于霉菌酵母计数培养

1、最常见的做法：平板培养（倾注或涂布）→ 倒扣培养

A. 制版（简要）

培养基常用：PDA（加氯霉素/抗生素抑制细菌）、DG18（低水活/耐干燥时用）、YGC/MEA（看方法要求）

接种方式一般是：

倾注法：样品匀液 + 培养基混匀 → 凝固

或表面涂布：已凝固平板表面涂布（更利于酵母菌计数/形态）

B. 放进两用箱前的“关键动作”（很多人忽略）

平板一定要倒扣（琼脂面在上、盖在下）

目的：防止冷凝水滴落到菌落上造成蔓延、互相污染。

边缘可用 Parafilm/封口膜半透气封边（可选但很有用）：

减少培养基失水干缩

降低皿盖内冷凝水乱跑

（不要气密封死，霉菌需要一点气体交换）

如果是倾注法且琼脂较浅/环境很干：可以在叠放层最上层空位放一块空白平板当“挡风板”。

2、干燥培养两用箱里的“正确养法”

设定参数

项目 推荐

模式 培养端（不要切到干燥高温档！）

温度 25℃（±1℃） 或 28℃（±1℃）；多数国标倾向 25–28℃区间

时间 5 d（常规）/ 可视情况延到 7 d（尤其霉菌慢、低污染水平）

光照 尽量暗培养（或用箱子自带半遮光；别放窗口晒）

风门/风机怎么处理（重点）

这类两用箱很多是强制对流：

风门不要开太大（否则平板会更快失水、琼脂缩边、边缘菌落异常）

更稳妥的做法：

放在中层，不要紧贴后壁出风口

平板之间留缝（≥1 cm），不要“满箱堵死”

摆放密度

箱内负载一般别超过容积 2/3

平板单层摆放最好；必须叠放就用专用隔板/架，别直接堆高成塔（气流不均+塌垛风险）

3、培养期间 & 读数时的关键细节

尽量少开门；观察用玻璃窗/手电。每次开门都会带来冷凝与温度漂移。

第 2–3 d可快速检查：霉菌是否“蔓延成片”（稀释不够/没加抑菌剂/培养太湿）

计数原则（通用）：

选 30–300 CFU（或你们方法规定的范围）的平板

霉菌：如果菌丝蔓延但不重叠、还能分辨“起源点”，有些方法可计“菌落形成单位”；严重蔓延通常判 需重做/稀释更高

酵母：一般按常规圆形光滑菌落计；注意区别“气泡/沉淀”和真菌落

做完的培养平板：121℃ 高压灭菌后再清洗（生物安全基本操作）。

4、常见坑（用两用箱做霉菌酵母最容易踩）

误切到“干燥档/高温”：直接把平板烤干 → 实验报废。

正放培养：冷凝水滴滴落 → 菌落蔓延一片，没法计数。

风太大/太干：琼脂缩边、边缘菌落变形、回收率下降（尤其 DG18 这类对水活敏感的体系）。

塞太满：温度场不均 → 一边长得好一边不长，重复性差。

用它当“防潮储存柜”长期放培养基：不行——反复冷热循环更容易凝露发霉。

• 科研干燥培养两用箱

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