一、实验材料与设备

（一）实验材料

大肠杆菌菌液与酿酒酵母菌液，作为本次实验的研究对象。

用于培养大肠杆菌的LB培养基，以及培养酿酒酵母菌的YPD养基。

（二）实验设备

隔水式恒温培养箱，用于为微生物培养提供稳定的温度环境。

超净工作台，保障实验操作过程中处于无菌状态。

锥形瓶、试管等容器，用于盛放培养基和菌液。

显微镜及配套的载玻片、盖玻片，以便观察微生物的形态与生长情况。

移液器和移液枪头，用于准确吸取和转移菌液及培养基。

高压灭菌锅，对培养基等进行灭菌处理，消除杂菌干扰。

二、实验过程

（一）培养基制备

在超净工作台内，依照既定配方分别配制LB培养基和YPD培养基。将配制好的培养基分装到锥形瓶中，装入量以满足实验需求为宜。之后，在瓶口塞上棉塞，并使用牛皮纸包裹，防止灭菌过程中受到污染。将包裹好的锥形瓶放入高压灭菌锅，在合适的压力与温度条件下进行灭菌处理。灭菌完成后，等待培养基自然冷却至室温，备用。

（二）接种操作

同样在超净工作台内，使用移液器吸取适量的大肠杆菌菌液，小心地注入装有LB培养基的锥形瓶中；更换新的移液枪头后，吸取酿酒酵母菌液，接种到装有YPD培养基的锥形瓶。整个接种过程严格遵循无菌操作规范，避免外界杂菌混入，影响实验结果。

（三）培养与观察

将接种后的锥形瓶放入隔水式恒温培养箱，设置三组不同的温度环境：A组设定为相对较低的温度，B组设定为适宜微生物生长的温度范围，C组设定为相对较高的温度。每个温度条件下，均放置培养大肠杆菌和酿酒酵母菌的锥形瓶。

培养开始后，每隔一段时间从培养箱中取出锥形瓶。使用移液器吸取少量菌液，滴加在载玻片上，盖上盖玻片，放置在显微镜下进行观察。详细记录不同时间点、不同温度条件下，大肠杆菌和酿酒酵母菌的形态特征，如大肠杆菌的杆状结构是否完整，酿酒酵母菌的出芽情况；同时，大致估算菌落数量的变化情况，以此判断微生物的繁殖速度。

三、实验结果与分析

（一）实验结果

在较低温度（A组）的环境中，大肠杆菌和酿酒酵母菌的生长明显较为缓慢。显微镜下观察发现，菌落数量较少，细胞个体形态相对较小，微生物的代谢活动也不活跃。

当处于适宜温度（B组）时，两种微生物的生长状态显著改善，呈现出旺盛的生长态势。大肠杆菌形态清晰，呈典型的杆状，繁殖速度明显加快；酿酒酵母菌频繁出现出芽生殖现象，菌落数量大幅增多。

而在较高温度（C组）条件下，微生物的生长受到明显抑制。部分大肠杆菌出现形态变形，细胞结构不再完整；酿酒酵母菌的出芽过程明显减缓，菌落数量增长变得十分缓慢，甚至出现停滞现象。

（二）数据分析

综合不同时间点、不同温度下对微生物菌落数量和形态变化的观察记录进行分析，可以清晰地看出：隔水式恒温培养箱的温度控制功能，对大肠杆菌和酿酒酵母菌的生长有着至关重要的影响。适宜的温度能够为微生物创造良好的生长环境，有效促进其新陈代谢和繁殖过程；反之，温度过高或过低，都会对微生物正常的生理活动产生干扰，从而抑制它们的生长。此外，不同种类的微生物，如本次实验中的大肠杆菌和酿酒酵母菌，对于温度的耐受范围以及最适生长温度存在一定差异。

四、实验结论

隔水式恒温培养箱能够可靠地应用于微生物培养实验，其稳定的温度控制性能对微生物的生长状态和繁殖速度起着关键作用。在使用该设备进行微生物培养时，实验人员必须根据微生物的种类特性，精确设置适宜的温度参数，只有这样，才能确保微生物在良好的环境中生长繁殖，进而获得理想的培养效果，为后续基于微生物培养的各类实验研究奠定坚实基础。

• ZGP系列隔水式恒温培养箱

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