二氧化碳培养箱在生物医学研究，尤其是癌症研究中扮演着关键角色。下面我们一起看下如何在二氧化碳培养箱中体外培养癌细胞，以利于对癌细胞生物学行为和治疗反应的研究。

实验所需材料与设备：

       ※二氧化碳培养箱：用于保持恒定的实验环境，包括温度、湿度和CO2浓度。

       ※癌细胞株：挑选适宜的癌细胞株，例如人肺癌细胞或乳腺癌细胞等。

       ※培养基：依据细胞类型挑选相应的培养基，通常包含必需的营养成分、生长因子和抗生素。

       ※实验试剂与耗材：包括胰蛋白酶、血清、培养容器、移液器等。

实验操作步骤：

步骤一：培养基的准备

       1.依据所选细胞株的要求配制相应的培养基。

       2.将配制好的培养基无菌条件下分装至培养容器中，每个容器大约装入20ml。

步骤二：细胞的接种

        1.从液氮罐中取出冻存的癌细胞株，迅速在37°C水浴中解冻。

        2.采用胰蛋白酶对细胞进行消化，制备成单细胞悬液。

        3.对细胞进行计数，调整细胞密度至适当的水平（通常为1x10^5个细胞/ml）。

        4.将细胞悬液加入预先准备好的培养容器中，每个容器中加入大约2ml。

步骤三：细胞的培养

        1.将装有细胞的培养容器放入二氧化碳培养箱，设定适当的温度（一般为37°C）、CO2浓度（一般为5%）和湿度。

        2.定期检查细胞的生长状况，每隔2-3天更换新鲜培养基。

        3.当细胞覆盖率达到约80%时，进行下一步的传代培养。

步骤四：细胞的传代

        1.弃去原有的培养基，用PBS缓冲液清洗细胞两次。

        2.加入适量胰蛋白酶消化细胞，轻轻摇晃容器，细胞脱落后，加入新鲜培养基以终止消化过程。

        3.将细胞悬液转移至新的培养容器中，继续进行培养。

总结：

        通过在二氧化碳培养箱中培养癌细胞，研究人员能够在体外模拟癌细胞生长的环境，进一步研究癌细胞的生物学特性，并为新型治疗策略的开发提供实验依据。

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