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液相色谱柱后衍生法,豆豉、腐乳中黄曲霉毒素检测

检测样品:豆豉 腐乳检测项目:黄曲霉毒素

方案概述:针对豆豉、腐乳基质可能存在难净化、杂质多的特点,普瑞邦技术工程师根据《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族G族的测定》中半流体样品实验方法及参考文献,进行了免疫亲和柱与多功能净化柱-免疫亲和柱双柱净化对比验证实验

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更新时间2021年09月17日

上传企业青岛普瑞邦生物工程有限公司

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针对豆豉、腐乳基质可能存在难净化、杂质多的特点,普瑞邦技术工程师根据《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素BG族的测定》中半流体样品实验方法及参考文献,进行了免疫亲和柱多功能净化柱-免疫亲和柱双柱净化对比验证实验,具体实验过程如下:

【标准品】黄曲霉毒素混合标准工作液:1ug/mL

【样品处理】

样品

豆豉(a)腐乳(b)

编号

a1(b1)

a2(b2)

a3(b3)

a4(b4)

处理过程

20mL70%甲醇水

20mL84%乙腈水

超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡 20min

超速离心10min,上清液备用

取提取液4mL过M160固相净化柱

/

取提取液4mL过M160固相净化柱

/

取2mL过柱后液体加18mL水稀释

取提取液2mL加18mL水稀释

取2mL过柱后液体加18mL水稀释

取提取液2mL加18mL水稀释

全部过普瑞邦免疫亲和柱,最终2mL甲醇定容上机

加标水平

5mg/L

1231.jpg

液相谱图如下:

b1:腐乳70%甲醇提取过多功能净化柱-免疫亲和柱双柱净化

b1.png

 

b2:腐乳70%甲醇提取只过免疫亲和柱净化

b2.png

 

b3:腐乳84%乙腈提取过多功能净化柱-免疫亲和柱双柱净化

b3.png

 

b4:腐乳84%乙腈提取只过免疫亲和柱净化

b4.png

 

 

a1:豆豉70%甲醇提取过多功能净化柱-免疫亲和柱双柱净化

a1.png

 

a2:豆豉70%甲醇提取只过免疫亲和柱净化

a2.png

 

a3:豆豉84%乙腈提取过多功能净化柱-免疫亲和柱双柱净化

a3.png

 

a4:豆豉84%乙腈提取只过免疫亲和柱净化

a4.png

 

【实验结果】

数据.png

通过实验验证,按照以上前处理流程,84%乙腈或70%甲醇提取后,过免疫亲和柱就能达到净化效果,但是70%甲醇提取腐乳、豆豉两种基质回收率偏低,建议实验过程为84%乙腈提取后过免疫亲和柱净化。

【采购指南】

采购.png

【液相条件】

流动相:甲醇:水 = 45:55

色谱柱:Pribolab真菌毒素检测专用柱(C18,250×4.6 mm,5 μm)

流速:1.0 mL/min

进样量:10 μL

光化学柱后衍生器:Pribolab® KRC

激发波长:360 nm,发射波长:440 nm。

 

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