Con A琼脂糖凝胶4B

  Con A琼脂糖凝胶4B简介：

英文名称：Con A Sepharose 4B
其他名称：拌刀豆球蛋白琼脂糖凝胶4B
Ligand density：10-16mg Con A/ml drained medium
Available capacity：20-45mg porcine thyroglobulin/ml medium
Bead structure：4% agarose
Bead size range：45～165um
Mean bead size：90um
Max linear flow rate：75cm/h at 25℃；HR 16/10 column；5cm bed height
pH stability：long term and working,short term ：4～9
Chemical stability：Stable to all commonly used aqueous buffers.Chelating agents such as EDTA, 8 M urea or solutions having a pH below 3 should be avoided as these conditions results in removal of manganese from the lectin with loss of activity as a result
Physical stability：Negligible volume variation due to changes in pH or ionic strength
 Con A琼脂糖凝胶4B亲和介质使用:
1、 装柱：该介质凝胶从4℃冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温，然后再装柱，以免产生气泡影响柱效。
2、 平衡：结合缓冲液（Binding Buffer）为20mmol/LTris-HCl缓冲液，pH7.4，其中含1mM MnCl2，1mM CaCl2，0.15M NaCl。由于介质保存液含有20%乙醇，因此装好柱的介质必须进行平衡。平衡介质所需的液体约为10个柱床体积。由于凝集素和糖基结合强度弱，为促进糖基结合，清洗缓冲液中可以不含有0.15M NaCl。
3、 吸附：预分离组分经过结合缓冲液透析后进行上柱吸附。
4、 清洗：待预分离组分已经都进入介质中后，加入清洗液体，洗去非特异吸附蛋白，大约5-10倍柱体积。
5、 洗脱：可以用0.1-0.5M糖类进行线性或梯度洗脱，例如用α-甲基-D-甘露糖苷（α-D-methylmannoside），或α-甲基-D-葡萄糖苷（α-D-methylglucoside），缓冲液为20mmol/L Tris-HCl缓冲液，pH7.4，并含有0.15M NaCl。强结合组分可以采用低pH值（但不得低于pH3）缓冲液 ,即用0.1M,pH6.5的硼酸缓冲液进行洗脱。
亲和介质再生：
ConA 琼脂糖凝胶的再生处理方法：每次采用2-3倍体积、含0.5M/L NaCL、高pH（8.5）值和低pH（4.5）缓冲液交替清洗柱子，交替3次。再用3-5倍体积的清洗缓冲液清洗。高pH值缓冲液可以采用0.1MTris-HCL,低pH值缓冲液可以采用0.1M柠檬酸缓冲液。洗脱强力结合的组分，可以采用20-50%乙醇线性洗脱
用途：Con A 琼脂糖凝胶用于各种含甘露醇及葡萄糖残基的糖、糖蛋白、糖脂等物质的分离纯化
保存：2～8℃