荧光抗体稀释液

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

产品分类：免疫组化

储存条件：室温,12个月  

用途：荧光抗体稀释,消除荧光抗体非特异性染色,可以用于减缓各种常见荧光抗体的荧光淬灭。Leagene荧光抗体稀释液主要由Kolmers盐溶液、抗荧光衰减剂组成。

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

*樱桃链格孢环化核苷调控阳离子通道蛋白亚型4Human SLC7A4 ELISA Kit大鼠α干扰(IFN-α)免疫试剂盒

汉逊德巴酵母HEAT重复内含蛋白8蛋白抗体Human SLC5A3 ELISA Kit大鼠α-辅肌动蛋白1(ACTN-1)免疫试剂盒

稀疏链霉菌稀疏变种雄激调节样蛋白抗体Human SLTM ELISA Kit大鼠αL岩藻糖苷(AFU)免疫试剂盒

芽孢杆菌雄激调节蛋白2抗体Human SLC6A8 ELISA Kit大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)免疫试剂盒

三叶草根瘤菌角化蛋白S100A18抗体Human SLC38A3 ELISA Kit大鼠α2-HS糖蛋白(AHSG)免疫试剂盒

产黑色链霉菌型肝炎病NS4B抗体Human SLC38A4 ELISA Kit大鼠α1微球蛋白(α1-MG)免疫试剂盒

黄杆菌异质性核糖核蛋白C1/C2抗体Human SLC9A11 ELISA Kit大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫试剂盒

蓝色犁头霉异质性核糖核蛋白RHuman SLC3A1 ELISA Kit大鼠α1抗前体(pre-α1-AT)免疫试剂盒

白地霉同源相互作用蛋白激4抗体Human SLC9A9 ELISA Kit大鼠VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)免疫试剂盒

球毛壳菌肝辅助因子II抗体Human SLCO6A1 ELISA Kit大鼠U型肌激,线粒体(CKMT1A)免疫试剂盒

钩状木霉组蛋白替换精蛋白DGGR1抗体Human SLC43A1 ELISA Kit大鼠T活化核因子5(NFAT5)免疫试剂盒

链格孢属透明质及粘蛋白4抗体Human SLC44A1 ELISA Kit大鼠Toll样受体9(TLR9)免疫试剂盒

绿叶假单胞菌神经特异性钙结合蛋白抗体Human SLCO4C1 ELISA Kit大鼠Toll样受体7(TLR-7)免疫试剂盒

枯草芽孢杆菌无毛发蛋白抗体Human APC(Adenomatous polyposis coli protein) ELISA Kit大鼠Toll样受体4(TLR4)免疫试剂盒

东方伊萨酵母心脏和神经嵴衍生蛋白2抗体Human SLC45A2 ELISA Kit大鼠toll样受体3(TLR3)免疫试剂盒

短小芽孢杆菌乙酰化组蛋白H4(K16)抗体Human SLC47A1 ELISA Kit大鼠toll样受体1(TLR1)免疫试剂盒

粉状毕赤酵母Pichia│farinosa 质量规格：分析标准品芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷

马腺疫链球菌兽疫亚种Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus 质量规格：10μg/ml,u=5%川续断皂苷VI

短芽孢杆菌Bacillus│brevis 质量规格：分析标准品异甘草
荧光抗体稀释液CCK ELISA Kit  大鼠胆囊收缩su/肠促胰mei肽规格： 48T

BGP/Gehrelin ELISA Kit  大鼠脑肠肽规格： 48T

6-K-PG ELISA Kit  大鼠6tong前列腺su规格： 48T

apo-A1 ELISA Kit  大鼠载脂蛋白A1规格： 48T

apo-B0 ELISA Kit  大鼠载脂蛋白B0规格： 48T

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。