GR 大鼠成纤维细胞系

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GR 大鼠成纤维细胞系

培养条件：

*培养基：DMEM高糖培养基90%；胎牛血清10%。

培养条件：37.0C  carbon dioxide（CO2）,5%

传代方法：

收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml*培养基，吸出，分到新的培养瓶中。1:3~1:6传代；2~3天1次。　

。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造

成生长不好。

冻存方法：   冻存液：基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

储存：液氮储存