供货周期 | 现货 | 规格 | 100次 |
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货号 | XY-D-1904 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
主要用途 | 科研 | 英文名称 | / |
保存条件 | 常温 | 有效期 | 1年 |
产品简介:
本产品是核酸除蛋白试剂盒,pH 偏碱性,用于DNA 提取时去除蛋白质等杂质。本产品不能用于 RNA 提取。DNA 纯化时苯-酚的作用是使裂解液中的蛋白质变性,同时抑制DNase 对 DNA 的降解作用。用苯-酚处理裂解液时,由于蛋白分子表面的很多极性基团与苯-酚相似相溶,故蛋白分子溶于酚相,而 DNA 溶于水相,从而将 DNA 和蛋白质分开。由于苯-酚与水有一定比例的互溶,所以如果使用非饱和酚,样品中的水分(含 DNA)会进入酚相,样品会丢失。同时水相中也会有少量的酚,这些残留的酚会抑制后续酶反应。而饱和酚就没有丢失样品的缺点,因为它已经提前充分吸足了水分(饱和酚中含 10%左右的水分),因此不会丢失样品。但由于仍然会有少数酚进入水相,抑制后续反应。氯仿的作用是让水和酚彻-底分开,不互溶,彻-底去除水相中的残留苯-酚,从水溶液中沉淀得到的 DNA 就没有酚污染。异戊醇的作用是降低表面张力,从而减少操作过程(常常有震荡步骤)中气泡的产生,而这些气泡的表面张力可能会使 DNA 断裂。另外,异戊醇还有助于水相和酚相分相,使离心后的上层水相(含 DNA)、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定,便于移取上清。
产品参数:
成分规格包装
核酸除蛋白溶液50 mL50 mL 棕玻瓶
微量核酸沉淀剂100 mL100 mL 本色瓶
使用手册1 份无
运输及保存
核酸除蛋白试剂盒(沉淀法)常温运输和保存,有效期 12 个月。
自备试剂
75%乙醇和超纯水。
使用方法:
1.将 0.5 mL 含核酸(DNA 和 RNA)的细胞裂解液,或含有核酸的酶反应液转移到 1.5 mL 塑料离心管中。
2.加入 0.5 mL 核酸除蛋白溶液。
3.涡旋震荡 2 分钟。
4.常温 13000 g 离心 5 分钟,溶液将呈两层相。将含有核酸的上层无色水相转移到一个新的离心管中。
5.在上清中加入 2 倍体积(1 mL)的微量核酸沉淀剂(用前需要摇晃混匀),颠倒 10
次充分混匀。
6.常温 13000 g 离心 15 分钟。
7.小心弃上清,不要触及管底离心面的沉淀。
8.加入 1 mL 自备的 75%乙醇,颠倒 10 次。
9.常温 13000 g 离心 3 分钟。
10.小心弃上清后短暂离心 30 秒,去掉残留的液体(约 50 L)。
11.室温敞开盖子两分钟。
12.加入自备超纯水或 TE 溶液溶解 DNA,然后进行浓度测定、电泳,PCR 等后续检测。
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