氨基酸(AA)检测试剂盒
- 公司名称 南京亿迅生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型号
- 产地
- 厂商性质 经销商
- 更新时间 2024/5/15 16:49:49
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| 供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业 |
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氨基酸(AA)检测试剂盒
产品名称 ：氨基酸(AA)检测试剂盒
货号 ：YX2159
产品规格 ：100T
储存条件 ：4℃。避光
有效期 ：6个月
产品简介 ：
检测原理是在弱酸条件下，氨基酸与茚三酮共热情况下能定量的产生蓝紫色的二酮茚胺(又称Ruhemans紫)，其吸收峰在波长570nm处，在一定范围内颜色深浅(即吸光度)与氨基酸浓度成正比，该试剂盒主要用于检测植物组织、血清、尿液、食品、药品等中的总游离氨基酸含量。
实验流程:
1、 准备样品
①植物样品：取新鲜植物组织，称取0.4g，按植物组织：AA Lysis buffer(1×)=0.4g：2.0ml的比例加入AA Lysis buffer(1×)匀浆或研磨，用无氨蒸馏水稀释至40ml，混匀，
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，
③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要用AA Lysis buffer(1×)进行匀浆，1000g离心5min，留取上清即为氨基酸粗提液
④高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的氨基酸，可以使用AA Lysis buffer(1×)进行恰当的稀释。
2、配制茚三酮显色液: 取0.3g茚三酮，溶解于50ml茚三酮稀释液，搅拌或超声处理至溶解，即为茚三酮显色液。
3、配制茚三酮工作液: 取适量的茚三酮显色液、AA Assay buffer，按茚三酮显色液：AA Assay buffer=35：3的比例混合，即为茚三酮工作液
4、配制维生素C工作液: 取出1支维生素C，准确溶解于30ml无氨蒸馏水，混匀
5、配制系列氨基酸标准溶液：取出氨基酸标准(50μg/ml)恢复至室温，用无氨蒸馏水将其稀释至10μg/ml，然后按下表继续稀释：
加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
氨基酸标准(10μg/ml) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
无氨蒸馏水 | 0.4 | 0.3 | 0.2 | 0.1 | 0 |
氨基酸浓度(μg/ml) | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 |
6、AA加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入
加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
无氨蒸馏水 | 0.30 | — | — |
系列氨基酸标准(1~5号管) | — | 0.30 | — |
待测样品 | — | — | 0.30 |
茚三酮工作液 | 0.45 | 0.45 | 0.45 |
维生素C工作液 | 0.15 | 0.15 | 0.15 |
混匀，80℃中加热20min，冰水迅速冷却。 | |||
7、AA测定：加60%乙醇2.1ml，混匀；立即以空白调零，分光光度计(比色杯光径1cm)测定标准管、测定管570nm处吸光度(记为A标准、A测定)。
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