A2780+GFP 人卵巢癌细胞+GFP

A2780+GFP 人卵巢癌细胞+GFP

细胞介绍

该细胞通过慢病毒转染的方式携带GFP基因。

细胞特性

1）来源：卵巢

2）形态：上皮细胞样，贴壁生长

3）含量：>1x10^6  细胞数

4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

细胞筛选

该细胞为稳定转染GFP的细胞，随细胞传代次数的增加，其GFP荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。

建议收到细胞后至少传3代，冻存留种后再进行筛选。

初次进行细胞筛选时，建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的wan全培养基维持培养，若无细胞漂浮或者漂浮较少，即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的wan全培养基继续筛选，以此类推，至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中，漂浮细胞大于60%，则停止筛选，换成正常培养基培养，至细胞密度约80%，可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖，可停止筛选，用不含药wan全培养基正常培养。

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10X,20X）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的wan全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的wan全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。                       

一．培养基及培养冻存条件准备

1）准备RPMI-1640培养基；10%优质胎牛血清；1%GlutaMAX-1谷an酰an；1%  P/S  双抗 ；

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二、细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mLwan全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，wan全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8mlwan全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）yi蛋白mei-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的wan全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

下面T25瓶为例；

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。

3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

注意事项

1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。

4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

5.客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以联系我们售后，随时给予解答。

A2780+GFP 人卵巢癌细胞+GFP相关热卖细胞

人肺癌细胞+RFP A549+RFP

 人肺癌细胞荧光素酶标记 A549+luc

人转移胰腺腺癌细胞吉西他滨耐药株 AsPC-1/GEM

 人胆囊癌细胞荧光素酶标记 GBC-SD+LUC

人永生化表皮细胞荧光素酶标记 HACAT+LUC

人非小细胞肺癌细胞荧光素酶标记 HCC827+LUC

人结肠癌细胞荧光素酶标记 HCT116+LUC

人结直肠癌氟niao嘧啶耐药株 HCT15/Fu

人结直肠癌zishan醇耐药株 HCT-15/Taxol

人宫颈癌细胞荧光素酶标记 HELA+LUC  

人胃癌细胞黄色荧光标记 HGC-27+YFP

人真皮成纤维细胞（原代细胞永生化） HSF(SV40)

人脐静脉内皮细胞（原代细胞永生化） HUVEC

人脐静脉内皮细胞永生化+RFP HUVEC+RFP

人脐静脉内皮细胞永生化+GFP HUVEC+GFP

人结直肠癌细胞氟niao嘧啶耐药株 LOVO/5FU

人结直肠癌细胞荧光素酶标记 LOVO+LUC

人肝星形细胞+GFP LX-2+GFP

人乳腺癌阿mei素耐药细胞 MCF-7/Adr

人乳腺癌细胞荧光素酶标记 MCF-7+luc

人乳腺癌X细胞+GFP MDA-MB-231+GFP

人乳腺癌细胞荧光素酶标记 MDA-MB-231+LUC

人高转移性肝癌细胞荧光素酶标记 MHCC-97H+luc

人胃癌细胞荧光素酶标记 NCI-N87+LUC

人神经母细胞瘤细胞 sh-sy5y转染突变型

人神经母细胞瘤细胞 sh-sy5y转染野生型

人乳腺癌细胞 SK-BR-3+LUC

人皮肤黑色素瘤细胞荧光素酶标记 SK-MEL-2+LUC

人卵巢癌细胞荧光素酶标记 SK-OV-3+LUC

人结直肠腺癌细胞+luc SW620+luc

人结直肠腺癌细胞+GFP SW620+GFP

人结直肠癌细胞氟niao嘧啶耐药株 SW620/5FU

人类星形胶质瘤耐替莫cuo胺细胞 U251 MG/TMZ

人类星形胶质瘤耐替莫cuo胺细胞荧光素酶标记 U251 MG/TMZ+LUC(3000)

人脑星形胶质母细胞瘤+RFP U87MG+RFP

云南宣威人肺腺癌细胞系+GFP XWLC-05+GFP

人乳腺癌细胞荧光素酶标记 ZR-75-1+luc

小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记 4T1+luc

小鼠黑色素瘤细胞荧光素酶标记 B16-F10+LUC

小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记 CT26+LUC

小鼠胶质细胞瘤荧光素酶标记 GL-261+luc

小鼠肝癌细胞荧光素酶标记 HEPA1-6+LUC

小鼠卵巢上皮癌细胞荧光素酶标记 ID8+LUC

小鼠骨肉瘤成骨细胞荧光素酶标记 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC

小鼠肺癌细胞荧光素酶标记 LLC+LUC

小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记 MC38+LUC

小鼠胚胎成纤维细胞 MEF(silie霉素C处理)

小鼠脑神经瘤细胞荧光素酶标记 neuro-2a+luc

小鼠胰腺癌细胞荧光素酶标记 panc02+LUC

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞+GFP RAW 264.7+GFP

小鼠前列腺癌细胞荧光素酶标记 RM-1+LUC

大鼠脑胶质瘤细胞绿色荧光标记 C6+LUC

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞低分化+GFP PC12低分化+GFP

中国仓鼠卵巢细胞k1 亚克隆系 CHO-K1（悬浮）

鸭胚胎成纤维细胞 Duck embryo

人胆囊上皮细胞永生化

人胰腺癌相关成纤维细胞永生化

人胰腺癌细胞永生化

人胆囊上皮细胞永生化+GFP GFP

C57小鼠巨噬细胞永生化

猪扁桃体上皮细胞永生化

人风湿性关节滑膜成纤维细胞永生化

猪脂肪干细胞永生化

鸭胚肝间质细胞永生化

羊睾丸间质细胞永生化

兔肝间质细胞永生化

人颈静脉球瘤细胞永生化

人主动脉内皮细胞永生化