ABG709-50 R5421 酵母感受态细胞
参考价 | ¥ 918 |
订货量 | ≥1包 |
- 公司名称 合肥恩派尔贸易有限公司
- 品牌 Abnbio
- 型号 ABG709-50
- 产地 国产
- 厂商性质 经销商
- 更新时间 2024/4/23 13:34:12
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供货周期 | 现货 | 规格 | 50X100ul |
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货号 | ABG709-50 | 应用领域 | 环保,食品,化工,生物产业,制药 |
主要用途 | 感受态细胞 |
基因型
MATα ura3-52 leu2 trk1Δhis3Δ200 his4-15trk2Δ1::pCK64
简单说明:
1、R5421酿酒酵母菌株为K+/钾离子缺陷型菌株,在文献中也称为CY162,MATα型,多用于K+/钾离子转运蛋白的鉴定试验中,也可用于K+/钾离子通道或钠钾离子泵的鉴定试验。Transformation marker为:ura3,leu2,该菌株可以在含有100mM KCl的培养基中正常生长,在含有5-10mMKCl的培养基中生长缓慢,当培养基中KCl浓度低于0.5mM,R5421(CY162)细胞停止生长。R5421感受态细胞经特殊工艺制作,pGADT7质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。
操作说明
1、取一支无菌的1.5ml EP管,依次加入预冷的目的质粒1-3µg,Carrier DNA 10µl(95-100 度5min 快速冰浴,重复一次),100µl冰上融化的感受态细胞,PEG/LiAc 500µl,轻轻翻转混匀6-8次;
2. 30℃水浴30min,每10min轻轻翻转混匀6-8次;
3. 每支加入20µl的二甲基亚砜;(用于提高转化效率,可不做)4. 42℃水浴15min,每5min轻轻翻转混匀6-8次;5. 12000rpm瞬时离心弃上清,每支加入1ml的YPDPlus于30℃复苏1h;(用于提高转化效率,可不做)6. 12000rpm瞬时离心弃上清,用100µl 0.9%NaCl重悬,涂板,30℃培养48-96h。
注意事项
1、感受态细胞最好在冰上融化。
2. PEG溶液在低温环境下会析出,请于常温下溶解后使用。