绵羊核孔蛋白155kda(NUP155) ELISA 试剂盒  

如何更好使用ELISA试剂盒
如：加样器不确，尤其10ul以下的加样器，对结果影响极大、保温设备不良、洗涤用水不规范。如何解决这些问题呢，下面为您介绍以下几点使用方法：
1．在使用过程校正加样器；10ul以下加样器采用进口产品（芬兰、法国等）；
2．仔细校正温度到37℃，水浴箱为佳；
3．必须使用去离子水或蒸馏水，不得用自来水、矿泉水等。
4．认真阅读使用说明书。
5．样品加样
（1）加样时一定要仔细。加样后，再检查，以防漏加、错加。
（2）加样后，反复抽吸3次混匀，防止血清聚集孔底，导致非特异性吸附。
6．洗涤
（1）每次注水洗涤，应静止30秒钟；
（2）选用吸水纸作为衬垫，每次洗涤后扣干孔内水分；
（3）可选用塑料洗涤瓶。
7．加酶反应
（1）包括阴性对照孔在内，各孔显色普遍偏深；
（2）包括阳性对照在内，各孔均无显色；
（3）阳性对照不显色，而其它样本显色正常；
（4）有些标本显色不深，判断阳性困难。

特别说明:
#.一周内使用可存于4℃，需长时间存放或多次使用建议存于-20℃.

ELISA试剂盒优点：
1、高效、灵敏、特异的抗体；
2、重复性和可靠性高；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
5、可检测指标齐全：细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等；
6、质量保证，限度的节省实验经费。

化学发光免疫分析试剂盒
1.在各孔中加入标准品或样品各100μL，37°C孵育90分钟
2.倒去孔内液体，拍干，加入100μL化抗体工作液，37°C孵育 60分钟
3.洗涤3次
4.加入 100μL酶结合物工作液，37°C孵育 30分钟
5.洗涤5次
6.加入100μL 发光底物混合液，37°C孵育5分钟左右
7.立即测定各孔的化学发光值
8.结果计算




ELISA优化加样需要注意哪些
科研ELISA在国内有许多种叫法，例如：ELISA检测试剂盒、ELISA 、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等，比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。
ELISA试剂盒加样的优化：在这一进程中，一般情况下有三次加样，它们分别是加标本，加酶物，加底物。冻住血清融解后，蛋白质部分浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，防止气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上剧烈振动。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只需待血清天然凝集、缩短后即可获得。也可在板孔中参与稀释液，再在其参与血清标本，然后在微型颤动器上颤动1分钟以确保混和。

一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，跨过一星期测定的需低温冰存。
1、血清：用无菌管搜集，室温血液自然凝固10-20分钟，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如出现堆积，应再次离心。
2、尿液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
3、血浆：应根据标本的要求挑选EDTA、或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应该再次离心。
4、胸腹水：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
5、脑脊液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
6、唾液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
7、细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管搜集。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
8、牛奶：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。

注：
1.以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月。

2.如果样本种类在实验手册中没有提到，一般需要做预实验以确定试剂盒能被用来检测您的样品。

3.用于组织或细胞裂解的化学裂解液中的某些化学物质可能会影响ELISA实验结果。

4.由于其他来源的抗原可能和本公司试剂盒中使用的抗体不匹配（例如，抗体的目标，是构象表位而不是线性表位），其他一些制造商的非重组或重组蛋白可能无法被本公司试剂盒所识别。

5.由于包括细胞活力，细胞数量，以及采样时间等因素，从细胞培养上清液提取的样品，可能无法被检测。

6.建议采用新鲜样品来检测，不要存放时间过长。否则，蛋白质降解和变性可能发生，*终导致错误的结果。

7.标本溶血会影响*后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测

绵羊核孔蛋白155kda(NUP155) ELISA 试剂盒 

如何更好使用ELISA试剂盒
如：加样器不确，尤其10ul以下的加样器，对结果影响极大、保温设备不良、洗涤用水不规范。如何解决这些问题呢，下面为您介绍以下几点使用方法：
1．在使用过程校正加样器；10ul以下加样器采用进口产品（芬兰、法国等）；
2．仔细校正温度到37℃，水浴箱为佳；
3．必须使用去离子水或蒸馏水，不得用自来水、矿泉水等。
4．认真阅读使用说明书。
5．样品加样
（1）加样时一定要仔细。加样后，再检查，以防漏加、错加。
（2）加样后，反复抽吸3次混匀，防止血清聚集孔底，导致非特异性吸附。
6．洗涤
（1）每次注水洗涤，应静止30秒钟；
（2）选用吸水纸作为衬垫，每次洗涤后扣干孔内水分；
（3）可选用塑料洗涤瓶。
7．加酶反应
（1）包括阴性对照孔在内，各孔显色普遍偏深；
（2）包括阳性对照在内，各孔均无显色；
（3）阳性对照不显色，而其它样本显色正常；
（4）有些标本显色不深，判断阳性困难。

特别说明:
#.一周内使用可存于4℃，需长时间存放或多次使用建议存于-20℃.

ELISA试剂盒优点：
1、高效、灵敏、特异的抗体；
2、重复性和可靠性高；
3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
5、可检测指标齐全：细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、优生优育检测等等；
6、质量保证，限度的节省实验经费。

化学发光免疫分析试剂盒
1.在各孔中加入标准品或样品各100μL，37°C孵育90分钟
2.倒去孔内液体，拍干，加入100μL化抗体工作液，37°C孵育 60分钟
3.洗涤3次
4.加入 100μL酶结合物工作液，37°C孵育 30分钟
5.洗涤5次
6.加入100μL 发光底物混合液，37°C孵育5分钟左右
7.立即测定各孔的化学发光值
8.结果计算




ELISA优化加样需要注意哪些
科研ELISA在国内有许多种叫法，例如：ELISA检测试剂盒、ELISA 、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等，比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。
ELISA试剂盒加样的优化：在这一进程中，一般情况下有三次加样，它们分别是加标本，加酶物，加底物。冻住血清融解后，蛋白质部分浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，防止气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上剧烈振动。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只需待血清天然凝集、缩短后即可获得。也可在板孔中参与稀释液，再在其参与血清标本，然后在微型颤动器上颤动1分钟以确保混和。

一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，跨过一星期测定的需低温冰存。
1、血清：用无菌管搜集，室温血液自然凝固10-20分钟，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如出现堆积，应再次离心。
2、尿液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分）。细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
3、血浆：应根据标本的要求挑选EDTA、或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应该再次离心。
4、胸腹水：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
5、脑脊液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
6、唾液：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
7、细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管搜集。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。
8、牛奶：用无菌管搜集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），细心搜集上清，保存过程中如有堆积构成，应再次离心。

注：
1.以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月。

2.如果样本种类在实验手册中没有提到，一般需要做预实验以确定试剂盒能被用来检测您的样品。

3.用于组织或细胞裂解的化学裂解液中的某些化学物质可能会影响ELISA实验结果。

4.由于其他来源的抗原可能和本公司试剂盒中使用的抗体不匹配（例如，抗体的目标，是构象表位而不是线性表位），其他一些制造商的非重组或重组蛋白可能无法被本公司试剂盒所识别。

5.由于包括细胞活力，细胞数量，以及采样时间等因素，从细胞培养上清液提取的样品，可能无法被检测。

6.建议采用新鲜样品来检测，不要存放时间过长。否则，蛋白质降解和变性可能发生，*终导致错误的结果。

7.标本溶血会影响*后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测