60712ES B-27无血清添加剂,去除维A,50X(非动物源）
- 公司名称 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型号 60712ES
- 产地
- 厂商性质 生产厂家
- 更新时间 2025/2/7 13:51:48
- 访问次数 331
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企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
分子生物学试剂，细胞生物学试剂，免疫学试剂，蛋白组学试剂等
| 供货周期 | 两周 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
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产品简介
B-27是一种最常被引用的神经细胞培养添加剂，是一种优化的无血清添加剂，用于支持胚胎、出生后和成年海马神经元和其他中枢神经系统（CNS）神经元的生长和活性维持。B-27无血清添加剂以50倍工作液提供，可以与Neuronal 培养基组合使用，用于神经细胞培养而无需再添加饲养层细胞。在神经元基础培养基中使用B-27添加剂，用于培养产前和胚胎神经元，以获得优化的活性和长期的存活率。
B-27 添加剂适用于大多数神经细胞培养，无血清细胞培养，可用于神经细胞生长及维持，干细胞增殖与分化。
60711ES是B-27 supplement, serum free,50X B-27无血清添加剂,50X (非动物源）。
60712ES是B-27 supplement without Vitamin A, serum free,50X B-27无血清添加剂,去除维生素A,50X (非动物源）。60712ES去除了维生素A，可防止神经干细胞向神经细胞分化。
产品信息
货号 | 60712ES10 |
规格 | 10 mL |
外观 | 液体 |
组分信息
●.Catalase ●.T3 ●.Putrescine | ●.Glutathione ●.l-carnitine ●.Putrescine | ●.Insulin ●.D（+）Galactose ●.Corticoseterone |
●.Linoleic Acid ●.DL-a-Tocopherol（Vitamin E) ●.Oleic acid ●.Lipoic acid | ●.Linolenic Acid ●.DL-a-Tocopherol Acetate ●.Biotin ●.Superoxide Dismutase | ●.Progesterone ●.Pipecolic acid ●.Human HOLO-Transferrin ●.Ethanolamine |
储存条件
-25~-15℃避光保存，有效期2年。
使用说明
B27细胞培养添加剂是50×浓度。使用前请用基础培养基(如Neurobasal)稀释到1×。如准备50 mL培养基：将1 mL的B27细胞培养添加剂(50×)加入到49 mL的基础培养基中。配置好的培养基，可于2~8℃避光保存1周。
培养基制备
（1）置于4°C解冻本产品。
（2）在使用前无菌添加2%本产品和0.5 mM L-酰胺至神经元基础培养基，配置成神经元培养基（注：下文中出现的“神经元培养基”即指此种添加了B-27添加剂和L-酰胺的神经元基础培养基）。注意：剩余的本产品可以等分成工作体积，并储存在-25~-20℃。在以后的试验中根据需要解冻相应体积的本产品。避免反复冻融。
（3）对于原代海马神经元培养，神经元培养基（由前述步骤制备）需要额外补充25 μM的L-酸，在培养的第4天以后的换液中应不再添加酸。配置好的培养基，可于2~8℃的避光保存1周。
2. 细胞培养步骤
下列步骤已在大鼠胎儿原代海马和皮层神经元，以及神经母细胞瘤细胞系中测试。
（1）用无菌的冷的0.05 mg/mL多聚赖氨酸水溶液包被培养表面(玻璃或细胞培养级塑料)，每平方厘米表面使用0.15 mL，在室温下保温1 h。
（2）去除多聚赖氨酸溶液，并用无菌蒸馏水冲洗两次(须清洗，因为多聚赖氨酸对细胞有毒性)。在超净工作台中打开培养板的盖子通风，直到每个孔干燥。培养板干燥后可以立即使用或在4°C最多保存2周。
（3）根据标准实验室程序或随细胞提供的说明书分离原代的大鼠神经元或解冻冻存的原代大鼠神经元。
（4）在预热的(37°C)神经元培养基中（如前所述的方法制备)接种细胞，建议的细胞密度为160个细胞/mm2，或必要时使用自行优化的细胞密度。注意：对于海马神经元，培养基中须添加25 μM L-酸，参见“培养基的制备”。
（5）在36~38°C，含5%二氧化碳的潮湿环境中培养（使用自然空气也是可接受的，但推荐含9%氧气和5%二氧化碳的气体环境）。
（6）培养4~24 h后，更换一半体积的新鲜培养基，继续在培养箱中培养。
（7）对海马神经元以外的细胞：在接种4天后，更换一半体积的新鲜的培养基，之后每三天重复一次。对海马神经元：接种三天后，用不含L-酸的新鲜培养基更换一半体积的培养基，之后每三天重复一次。注意：在培养基中添加25 µM ，可改善海马神经元的长期存活率。
3. 分离原代大鼠胚胎神经元
下列程序推荐用于培养受精18天的大鼠胚胎海马神经元和大脑皮层神经元。
（1）从受精18天的大鼠胚胎中分离大脑皮层和双侧海马。
（2）在预置了培养基的锥形管中收集所有的组织。放置，直到所有的组织都已解体。
（3）使组织沉积在管的底部，然后小心地去除上清液，只留下刚好可覆盖组织的最少量的培养基。
（4） 在不含钙离子的培养基中，使用2 mg/mL过滤灭菌的木瓜蛋白酶溶液，在30°C酶解组织大约30 min，其间每5 min轻摇锥形管以帮助降解。每对海马组织使用2 mL酶溶液。
（5）加入两倍体积的培养基以恢复二价阳离子的浓度，停止酶解。
（6）使未解离的组织沉降至管底（约2 min），然后把上清液转移到15 mL离心管中，以150×g离心5 min。
（7）在1 mL神经元培养基中重悬沉淀物，取一小份(例如10 μL)进行细胞计数。后续的操作按照“复苏和培养冻存的神经元”的第8-10步骤进行。
4. 复苏和培养冻存的神经元
重要提示：原代神经元细胞将会贴附在裸露的塑料或玻璃表面，建议事先用神经元培养基冲洗所有的塑料和玻璃器皿的内表面，以获得最高的回收率和产量。由于细胞从冻存状态复苏时极其脆弱，请在整个操作过程中不要震荡或离心细胞。我们建议每次只解冻一管细胞。务必减少从液氮中转移冻存管到37°C水浴中的操作时间。细胞从液氮罐到水浴的运输过程中，可在冰桶中放少量液氮，将细胞置于这个冰桶中来进行。
（1）在解冻细胞之前，用神经元培养基冲洗无菌的15 mL锥形管，然后在超净工作台中通风晾干。
（2）从液氮中取出冻存管时可稍微拧松管帽以释放压力，然后再拧紧。
（3） 在37°C水浴中轻柔搅拌冻存管以快速解冻细胞（小于2 min）。当观察到冻存管中只有很少量的冰晶存在时（触摸冻存管仍然感觉是冷的）从水浴中取出。
（4）在超净工作台中用70%的异丙醇消毒冻存管。在工作台台面上轻敲冻存管以使管内液体沉降到管底。
（5）使用事先用神经元培养基冲洗并干燥过的1 mL吸头极其轻柔地将细胞转移到事先冲洗并干燥的15 mL锥形管中。
（6）用1 mL预热的神经元培养基冲洗冲洗冻存管，以每秒一滴的速度极其缓慢地加入到15 mL锥形管中的细胞里。每加一滴都轻柔地转动锥形管一次。不要一次即把全部培养基加到锥形管中。
（7）慢慢地逐滴加入另外2 mL预热的培养基，使管内的液体体积为4 mL。用1 mL吸头轻柔地混合液体，注意不要造成任何气泡。
（8）用一个事先冲洗干燥过的吸头吸取10 μL细胞悬液加入到含有10 μL 0.4%台盼蓝的微量离心管中，轻敲管壁以混匀溶液。使用手动的细胞计数方法测定活细胞密度。解冻的细胞的活率应超过50%。
（9）在已经事先用多聚赖氨酸包被（参见“细胞培养步骤”）的48孔板中每孔中接种大约1×105个细胞或按所需的细胞密度接种。加入预热的神经元培养基将细胞悬液稀释到每孔500 μL。
（10）按照“细胞培养步骤”中的5-6步骤进行神经元的培养。在36~38°C，含5%二氧化碳的潮湿环境中培养（使用自然空气也是可接受的，但推荐含9%氧气和5%二氧化碳的气体环境）。
注意事项
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 避免反复冻融，应及时分装，最好在４℃下过夜融化，稀释时要求在无菌环境中进行。
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