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药用级玉米朊药典标准CDE登记有资质

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玉米朊

Yumiruan

Zein

　　[9010-66-6]

　　本品系从玉米麸质中提取所得的醇溶性蛋白。按干燥品计算，含氮（N）量应为13.1%～17.0%。

　　【性状】本品为黄色或淡黄色薄片，一面具有一定的光泽；或为黄色或淡黄色粉末。

　　本品在80%～92%乙醇或70%～80%丙酮中易溶，在水或无水乙醇中不溶。

　　【鉴别】（1）取本品约20mg，剪碎，加90%乙醇2ml使溶解，加10%醋酸铅溶液2ml，即产生白色沉淀。

　　（2）取本品约0.1g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液10ml和硫酸铜试液数滴，置水浴中加热，即变为紫色。

　　（3）取本品约25mg，滴加硝酸1ml，用力振摇，溶液变成亮黄色，再加6mol/L氨水10ml，溶液即变为橙黄色。

　　（4）取本品10mg，置10ml离心管中，加溶剂（取异丙醇55ml，β-巯基乙醇2ml，加水至100ml）10ml，用涡旋混合器混合振荡使样品全溶解，再以每分钟11 000转的转速离心10分钟，取上清液作为供试品贮备液，取供试品贮备液与缓冲液（取三羟甲基氨基甲烷6.0g，加水70ml，用盐酸调节pH值至6.8，加丙三醇20ml，十二烷基硫酸钠4.0g，溴酚蓝0.005g，加水至100ml）（1：1）混合，将混合溶液置于密封的微量离心管中95℃放置10分钟，再置冰浴中冷却，作为供试品溶液。取合适的含有10～190kDa或10～l00kDa蛋白条带的分子量标记物（蛋白标准品可商业购买）与缓冲液（1：1）混合，将混合溶液置于密封的微量离心管中95℃放置10分钟，再置冰浴中冷却，作为标准蛋白溶液。分别取标准蛋白溶液与供试品溶液各10μl（上样量约为5μg），照电泳法（通则0541第五法）测定，分离胶溶液为30%丙烯酰胺溶液（取丙烯酰胺60g与亚甲基双丙烯酰胺1.6g，加水至200ml，滤纸滤过，避光保存）-分离胶缓冲液（取三羟甲基氨基甲烷36.3g，加适量水溶解，用盐酸调节pH值至8.8，加水稀释至100ml）-20%十二烷基硫酸钠溶液-10%过硫酸铵溶液（临用新配）-四甲基乙二胺-水（3.5：1.5：0.08：0.1：0.01：5.3），电压为100V，运行时间为2.5小时或前沿到达凝胶顶部。以标准蛋白分子量的对数为纵坐标，相对迁移率为横坐标，计算回归方程，供试品在19～26kDa应含有两个主要的蛋白质带。