SF213 1.1×S4 Fidelity PCR Mix（dye-）

产品特点

 操作简单：1.1×即用型预混液，无需添加ddH2O，大程度地减少实验步骤；

 高保真：保真度为野生型Taq酶的30倍；

 极快的延伸速度：10~15 s/kb；

 超高的耐热性能：98℃热处理1 h后聚合酶活性无明显变化。

产品简介

1.1×S4 Fidelity PCR Mix（dye-）为1.1×即用型快速PCR预混液，内含S4 Fidelity DNA polymerase、dNTPs以及优化的缓冲体系，只需添加引物和模板即可进行扩增，可有效扩增5 kb以内的DNA片段。

该酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性，扩增产物为平末端，可直接用于平末端克隆。

产品组成

保存条件 

-20℃保存 24 个月

适用范围 

本产品适用于以试剂盒提取的基因组 DNA、cDNA 和质粒 DNA 的 PCR 扩增，如基因鉴定、基因克隆等实验。 

注意事项 

1. 本产品为 1.1×PCR 预混液，无需额外添加 ddH2O。每次反应中该产品用量至少应占到总反应体积的 85%，50 μL 体系至少使用 43 μL PCR Mix，25 μL 至少使用 21 μL PCR Mix；

2. 请使用高质量的模板进行扩增，如试剂盒提取的基因组 DNA。请勿使用 dUTP 或含U嘧啶的引物与模板；

3. 3. PCR Mix 应避免反复冻融，短期内多次使用可置于 4℃保存。

常见问题与解决办法 

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Q1：扩增无产物或产物量少？ 

A1： 

1) 模板降解或模板纯度差。电泳检测模板质量，使用高质量模板； 

2) 模板浓度过低。适当增加模板用量； 

3) 引物不合适。优化引物设计； 

4) 退火温度不合适。设置退火温度梯度，摸索合适的退火温度； 

5) 循环数过少。适当增加 5~10 个循环； 

6) 延伸时间不足。复杂模板可适当增加延伸速度至 20~30 s/kb。 

Q2：扩增出现非特异条带或弥散带？ 

A2： 

1) 引物特异性差。优化引物，避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增；

2) 引物浓度过高。降低引物浓度； 

3) 模板过量或纯度差。减少模板量，使用高质量模板； 

4) 退火温度过低。适当提高退火温度或使用 Touchdown PCR 程序； 

5) 循环数过多。减少循环数至 25~30 cycles。