D2650 DMSO二甲基亚砜

【产品名称】DMSO二甲基亚砜

【产品规格】100ml

【产品品牌】sigma

【产品库存】现货

【产品简介】DMSO二甲基亚砜是一种渗透性保护剂，用途广泛，能够降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。

【产品应用】二甲基亚砜是一种用于化学反应（如聚合酶链式反应 (PCR)）的极性非质子溶剂，也可作为冷冻保护玻璃化剂用于保存细胞、组织和器官。DMSO 可在细胞冷冻培养基中用于保护细胞免受冰晶导致的机械损伤。它可用于原代、继代培养和重组的异倍体和杂交瘤细胞系、胚胎干细胞 (ESC) 以及造血干细胞的冻存。DMSO 常与 BSA 或胎牛血清 (FBS) 一同使用。

【注意】在室温下容易过冷并缓慢重融。 固化产品可以通过加热至室温来重新液化，而不会损害产品。用的时候要避免其挥发，因此需要准备1%-5%的氨水备用。若皮肤不慎沾上后，可用大量的清水及稀氨水冲洗。                   

【冻存程序】

 以下程序适用于大多数细胞，如果必要，可以适当调整。冻存培养基的配方请参考其细胞说明书。

1.冻存前先检测细胞是否受到细菌、真菌、支原体和病毒的污染。通常冻存后10-14天才能得到污染检测结果，如果确定有污染，应将该细胞销毁。

2.冻存培养基由wan全培养基和5% DMSO（sigma D2650）组成。由于DMSO的溶解会放热，所以不能向细胞悬液中直接加入未稀释的DMSO。

3.以温和速度（125g×10 min）离心收集细胞，并以1×10*6-5×10*6活细胞/ml的密度重悬细胞。继续培养细胞直到复苏后细胞活性得以确定。

4.在冻存管上标记好细胞名称，编号和冻存日期等信息。然后每管加入1-1.8 ml细胞悬液（视冻存管体积）并密封。

5.室温条件下，将细胞在冻存培养基中平衡15-40 min（勿超）。这段时间中，可以将细胞悬液等分加入冻存管中。40min后，细胞活性可能会受到DMSO的影响而下降。

6.将冻存管置于已预冷至4℃的程序降温盒，并将降温盒置于-70℃（或更冷）的冰箱中至少24小时。或者，使用已预冷至4℃的可编程电子降温系统以1℃/min的速度将冻存管降温至-40℃以下，然后迅速降至-130℃。

7.将冻存管迅速转移至液氮罐或者-130℃冰箱。通常，冷冻的细胞会以10℃/min的速度升温，一旦达到-50℃以上，细胞会剧烈受损。

8.记录冻存位置和过程细节等信息。

9.置于-130℃ 24小时后，取出一只冻存管并复苏，以测定细胞活性和是否污染。