Nobimpex 无血清T细胞培养基 003 004

Nobimpex 无血清T细胞培养基 003  004套装适用于促进和优化人来源 T 细胞的扩增。此培养基可支持高密度细胞的培养。无血清培养相比含血清培养可以减少批次差异，并且可以消除血清带来的安全隐患。该培养基套装包含“无血清T细胞促生长添加剂Nobimpex 004（货号N104-0050，50ml）”和“无血清T细胞扩增培养基Nobimpex003（货号N103-1000，1000ml）”。其中 “Nobimpex 004”独立使用于免疫细胞治疗中T细胞前5天的扩增培养，而“Nobimpex 003”则完成T细胞扩增培养的后续几天的工作。

无动物来源成分：

Nobimpex T细胞培养基套装均为无血清培养基，不含血清及其他动物来源成分，不含抗生素和细胞因子，人血清白蛋白和人转铁蛋白是仅有的人来源成分（供体的HIV1&2、HBV和HCV检测为阴性）。

高质量控制：

培养基的配制：

Nobimpex 003需要添加，加入 20ml200mM 的L-溶液或者0.584 g  L-谷粉末（辐射灭菌）每升。建议“Nobimpex 004”按照细胞培养前5天、分2次进行添加（每次25ml）；5天后使用适量的“Nobimpex 003”进行培养扩增。所有培养基在使用前请按照确定的配方分别添加必须的刺激用抗体和细胞因子。该培养基是无菌液体（1X），可按需选择添加抗生素。

使用说明：

1.   取25ml“Nobimpex 004培养基”添加确定量的刺激用抗体和细胞因子；

2.   按照已确定的方法来准备新鲜或者冻存的 PBMNCs (外周血单个核细胞)；

3.   用计数器计数细胞数量；

4.   转移适当数量的细胞到含有上述培养基（已加入细胞因子和刺激抗体）的培养瓶中；

5.   把培养瓶放入培养箱中，37 ℃，5% CO2培养；

6.   第3天，添加另外25ml已配制好的“Nobimpex 004培养基” （已加入细胞因子和刺激抗体）；

7.   第5天及其余时间，添加适量的已配制好的 “Nobimpex 003培养基” （已加入细胞因子和刺激抗体）。

产品特性:

Nobimpex 无血清T细胞培养基套装(Nobimpex003&004)已经经过严格的测试，可用于PBMNC中的T细胞扩增。本产品已与其他几种商业化可用的无血清培养基做了T细胞扩增比较。实验中，200，000 PBMNCs/ml 在本产品和另一商业化培养基中培养7天，培养基含有100 IU/ml IL-2和anti-CD3 (OKT3， 20ng/ml)抗体。

实验中扩增的T细胞使用51铬释放分析来测试细胞溶解能力。靶细胞(K562，人慢性白血病细胞)，使用51铬标记并连接到anti-CD3 (OKT3) Fc受体。当与效应或者细胞毒T细胞混合时，靶细胞就会凋亡或者溶解，并释放51铬。上清中51铬的释放量与靶细胞的死亡及功能T细胞的数量成正比。