FKM 多光谱荧光动态显微成像系统

　　FKM多光谱荧光动态显微成像系统是目前功能强大全面的植物显微荧光研究仪器，是基于FluorCam叶绿素荧光成像技术的显微成像定制系统。它由包含可扩展部件的增强显微镜、高分辨率CCD相机、激发光源组、光谱仪、控温模块以及相应的控制单元和专用的工作站与分析软件组成。它不仅可以进行微藻、单个细胞、单个叶绿体乃至基粒-基质类囊体片段进行Fv/Fm、Kautsky诱导效应、荧光淬灭、OJIP快速荧光响应曲线、QA再氧化等各种叶绿素荧光及MCF多光谱荧光(multicolor fluorescence)成像分析；还能通过激发光源组进行进行任意荧光激发和荧光释放波段的测量，从而进行GFP、DAPI、DiBAC4、SYTOX、CTC等荧光蛋白、荧光染料以及藻青蛋白、藻红蛋白、藻胆素等藻类荧光色素的成像分析；更可以利用光谱仪对各种荧光进行光谱分析，区分各发色团(例如PSI和PSII及各种捕光色素复合体等)并进行深入分析。
 

　　FKM多光谱 荧光动态显微成像系统使荧光成像技术真正成为光合作用机理研究的探针，使科研工作者在藻类和高等植物细胞与亚细胞层次深入理解光合作用过程及该过程中发生的各种变化，为直接研究叶绿体中光合系统的工作机理提供了有力的工具。FKM作为藻类/植物表型和基因型显微研究的双重利器，得到了学界的广泛认可并取得了大量的科研成果。
 

　　
 

　　
 

　　FKM多光谱荧光动态显微成像系统功能特点：
 

　　Ø  内置现今叶绿素荧光研究的全部程序，如Fv/Fm、Kautsky诱导效应、荧光淬灭、OJIP快速荧光响应曲线、QA再氧化等，可获得70余项参数。
 

　　Ø  配备10倍、20倍、40倍、63倍和100倍专用生物荧光物镜，可以清晰观测到叶绿体及其发出的荧光。
 

　　Ø  激发光源组中包括红外光、红光、蓝光、绿光、白光、紫外光和远红光等，通过红蓝绿三色光还可以调出可见光谱中的任何一种色光，能够研究植物/藻类中任何一种色素分子或发色团。
 

　　Ø  可进行GFP、DAPI、DiBAC4、SYTOX、CTC等荧光蛋白、荧光染料的成像分析。
 

　　Ø  高分辨率光谱仪能够深入解析各种荧光的光谱图。
 

　　Ø  控温系统可以保证实验样品在同等温度条件下进行测量，提高实验精度，也可以进行高温/低温胁迫研究。
 

　　应用领域：
 

　　Ø  微藻、大型藻类/高等植物的单个细胞、单个叶绿体、基粒-基质类囊体片段等的显微结构植物光合生理研究。
 

　　Ø  藻类/植物逆境研究。
 

　　Ø  生物和非生物胁迫的研究。
 

　　Ø  藻类/植物抗胁迫能力及易感性研究。
 

　　Ø  突变体筛选及光合机理研究。
 

　　Ø  藻类长势与产量评估。
 

　　Ø  藻类色素与光合作用关系。
 

　　Ø  藻类/植物——微生物交互作用研究。
 

　　Ø  藻类/植物——原生动物交互作用研究。
 

　　Ø  基因工程与分子生物学研究。
 

　　测量样品：
 

　　Ø  植物活体切片
 

　　Ø  植物表皮
 

　　Ø  植物细胞
 

　　Ø  绿藻、蓝藻等各种单细胞和多细胞微藻
 

　　Ø  叶绿体提取液
 

　　Ø  类囊体提取液
 

　　Ø  含有叶绿体的原生动物
 

　　
 

　　工作原理：
 

　　FKM分析过程中，通过连接在显微镜上的激发光源组和内置在6位滤波轮中的一系列滤波器、分光镜激发植物样品中各种发色团的动态荧光。样品激发出的荧光经显微镜放大后进行荧光光谱分析和荧光动力学成像分析。SM 9000光谱仪通过光纤与显微镜连接，以进行激发荧光光谱分析。安装在显微镜顶部的高分辨率CCD相机则用于荧光动力学成像分析。全部工作过程通过工作站和控制单元按照预先设定好的程序自动进行。测量过程中，可通过温控模块调控藻类、植物细胞等实验样品的温度。蠕动泵可以实现培养藻类的连续测量。
 

　　
 

　　技术参数：
 

　　Ø  测量参数：50多个叶绿素荧光参数，每个参数均可显示二维荧光彩色图像。
 

　　Ø  可测定OJIP快速荧光曲线。
 

　　Ø  GFP、DAPI、DiBAC4、SYTOX、CTC等荧光蛋白和荧光染料的成像分析(选配)。
 

　　Ø  QA再氧化动力学曲线(选配)。
 

　　Ø  Spectrum荧光光谱图(选配)。
 

　　Ø  具备完备的自动测量程序(protocol)，可自由对自动测量程序进行编辑。
 

　　Ø  荧光激发光源：红外光、红光、橙光、蓝光、绿光、白光、紫外光等可选，根据客户要求定制光源组。
 

　　Ø  透射光源(选配)：白光、远红光。
 

　　Ø  高分辨率TOMI-2 CCD传感器。
 

　　Ø  通讯模式：千兆以太网。
 

　　Ø  显微镜：Axio Imager M2，可选配Axio Scope A1简洁版或Axio Imager Z2高级版。
 

　　Ø  物镜：10倍、20倍、40倍、63倍和100倍专用生物荧光物镜(可选)。
 

　　Ø  6位滤波轮：叶绿素荧光、GFP/SYTOX、DAPI/CTC等。
 

　　Ø  客户定制实验程序协议(protocols)：可设定时间(如测量光持续时间、光化学光持续时间、测量时间等)、光强(如不同光质光化学光强度、饱和光闪强度、调制测量光等)，具备专用实验程序语言和脚本，用户也可利用Protocol菜单中的向导程序模版自由创建新的实验程序。
 

　　Ø  具备自动测量分析功能，快照模式，成像预处理。
 

　　Ø  数据分析模式：具备“信号计算再平均”模式(算数平均值)和“信号平均再计算”模式，在高信噪比的情况下选用“信号计算再平均”模式，在低信噪比的情况下选择“信号平均再计算”模式以过滤掉噪音带来的误差。
 

　　Ø  输出结果：高时间解析度荧光动态图、荧光动态变化视频、荧光参数Excel文件、直方图、不同参数成像图、不同ROI的荧光参数列表等。
 叶绿素荧光与光谱分析结果：