总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒(FRAP 法)
- 公司名称 上海恒远生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型号
- 产地 上海
- 厂商性质 生产厂家
- 更新时间 2023/3/20 9:50:04
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供货周期 | 现货 |
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中文名称 | 总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒(FRAP 法) |
规格 | 96样 |
货号 | A-033-SH |
价格 | 面议 |
样本类型 | 血清,血浆,组织匀浆,细胞裂解液、细胞培养上清液等 |
检测范围 | 详见说明书 |
检测方法 | 微量法 |
货期 | 3-5天 |
说明书 | 咨询我司业务员获取 |
文献 | 咨询我司业务员获取 |
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
测定原理:
在酸性环境下,抗氧化物质还原 Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的 Fe2+-TPTZ 的能力反映了总抗氧化能力。
自备实验用品:
恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体 120mL×1 瓶,使用前预冷。
试剂一:液体 20 mL×1 瓶,避光保存。
试剂二:液体 2 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体 2 mL×1 瓶,避光保存。
混合液(现配现用):将试剂一、试剂二、试剂三按 10:1:1 的比例混合,使用前 37℃预温。
样品的制备:
(1)血清、血浆、唾液或尿液等液体样品
血浆(制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝,不宜使用 EDTA 抗凝)4℃,5000rpm 离心10min,取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超过30 d)后再测定。
(2)组织样品
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
(3)细胞样品
按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入1mL 提取液),冰浴超声波破碎(功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
操作步骤:
1、酶标仪预热 30min,调节波长至 593nm。
2、操作表
空白管 | 测定管 | |
样品(μL) | 10 | |
提取液(μL) | 10 | |
混合液(μL) | 190 | 190 |
充分混匀,反应 20min,于 96 孔板,测定 593nm 吸光值,△A= A 测定-A 空白 |
注意:空白管只需测定一次,若测定管吸光值大于 1.5 则需要用提取液稀释。